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小鼠胚胎成纖維細胞

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更新時間:2016-03-31 19:54:12瀏覽次數(shù):375次

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小鼠胚胎成纖維細胞具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。
從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。
初學者易犯錯誤:水浴鍋未預熱或者未預熱到37。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導致傳熱不佳,使融化時間延長。
離心前忘記平衡,導致離心機損壞和細胞丟失。
一次復蘇細胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導致細胞交叉污染。
實驗前準備:將水浴鍋預熱至37
小鼠胚胎成纖維細胞75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:

迅速將凍存管投入到已經(jīng)預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
.-2min

凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機中3000r/min 離心3min
制備細胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細胞懸液。
活化與細胞復蘇    收到細胞株包裹時, 請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存置于70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)
 細胞復蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96液氮中的細胞快速融化至37,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。
細胞計數(shù):細胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細胞將復合細胞計數(shù)要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入375CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時或者24-48小時后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:00- DAB substrate Kit BR,試劑盒 00毫升 DAB substrate Kit DAB substrate Kit
00-3 DAB complete peroxidase substrate system BR,試劑盒 00毫升 DAB complete peroxidase substrate system DAB complete peroxidase substrate system
00 溴乙啶/溴化乙啶/溴化-3,8-二氨基-5-乙基-6- 基菲啶翁/溴化乙錠/EB 生物技術級,98%,劇&品 克 Amresco049 39-45-8 39-45-8溴乙啶 溴乙啶 EB
Amresco049
Amresco049
生物技術級,0mg/ml,劇&品 5毫升 AmrescoX38
生物技術級,0.65mg/ml,附滴瓶 5毫升 AmrescoE406原裝
003 碘化丙啶/碘化丙錠/PI ACS,95% 0毫克 5535-6-4 5535-6-4碘化丙啶 碘化丙啶 PI
00毫克
BR,mg/ml 0毫升
005 "N-乙基-N-(-羥基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基 胺鈉鹽/DAOS
" BR,99% 克 83777-30-4 83777-30-4N-乙基-N-(-羥基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基 胺鈉鹽 "N-乙基-N-(-羥基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基 胺鈉鹽 DAOS
" 006 4-硝基 磷suan"二鈉/對硝基 磷suan"二鈉/4-硝基 基磷suan"二鈉鹽六水物/磷suan"-4-硝基 酯二鈉鹽/ PNPP-NA/4-NPP 試劑級,98% 克 464-83-9 464-83-94-硝基 磷suan"二鈉 4-硝基 磷suan"二鈉 4-NPP

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