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所 在 地上海市
更新時間:2017-12-18 00:50:50瀏覽次數(shù):440次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線狗腎細(xì)胞具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時核對管外的編號。
初學(xué)者易犯錯誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
狗腎細(xì)胞用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時, 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:070 氨三乙suan"/氨基三乙suan"/氮三乙suan"/N,N-雙(羧甲基)甘氨suan"/三(羧甲基)胺/三甘氨suan"/α,α′,α″-*基胺三羧suan"/氨羧絡(luò)合劑I/絡(luò)合劑I/托立龍A/特里隆A/氮川三乙suan"/次氮基三乙suan"/次氨基三乙suan"/NTA AR,98.5%,有害品 50克 國產(chǎn) 39-3-9 39-3-9氨三乙suan" 氨三乙suan" NTA
07 &化血紅素/血晶素/血紅素/卟啉鐵/血晶/鹽suan"血紅素/&高鐵血紅素/Hematin chloride BR,98% 克 6009-3-5 6009-3-5&化血紅素 &化血紅素 Hematin chloride
07 4-&--萘酚/4-&-α-萘酚/4CN/4-CN 超純,99% 604-44-4 604-44-44-&--萘酚 4-&--萘酚 4-CN
073 -萘酚/-羥基萘/甲萘酚/α-萘酚/α-羥基萘/-Naphtyol AR,99%,有害品 國產(chǎn) 90-5-3 90-5-3-萘酚 -萘酚 -Naphtyol
國產(chǎn)
074 -萘酚/二萘酚/乙萘酚/異萘酚/β-萘酚/β-羥基萘/-羥基萘/-Naphthol AR,99%,有害品及危害環(huán)境 國產(chǎn) 35-9-3 35-9-3-萘酚 -萘酚 -Naphthol
500克 國產(chǎn)
075 鄰 二酚/兒茶酚/焦性兒茶酚/,-二羥基 /,- 二酚/Pyrocatechol CP,98%,&害品 國產(chǎn) 0-80-9 0-80-9鄰 二酚 鄰 二酚 Pyrocatechol
500克 國產(chǎn)
076 乙二醛縮雙(鄰氨基酚)/乙二醛縮雙鄰羥 胺/乙二醛雙(-羥基 胺)/鈣紅/GBHA
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