羊抗兔IgG（全分子）-FITC抗體*,羊抗兔IgG（全分子）-FITC抗體用于免疫組化實驗，WB實驗，相應的標記抗體有HRP標記抗體，F(xiàn)ITC標記，BIO等。

【貯存條件】： 貯存于-20℃. 本品應在低溫下保存，長時間在暴露在空氣中，含量會有所降低。

規(guī)格：0.5ml/ml

材料和方法

　　. 材料 人成骨肉瘤MG63細胞為本實驗室保存。重組質粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王巖教授惠贈。脂質體 2000( Invitrogen公司)。高糖DMEM培養(yǎng)基(美國Gibco 公司)，胎牛血清(Hyclone公司)，和EDTA(Sigma 公司)。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)?？贵w：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒(邁晨科技有限公司)。

　　.2 蛋白印跡實驗 MG63細胞鋪于35 mmol/L培養(yǎng)皿中，待細胞密度達到60%～70%時，轉染MycSSHL，48 h后換無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)3 h，分別加入濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育0 min后裂解細胞，離心取上清加入凝膠加樣緩沖液,沸水浴上加熱5 min，上樣、電泳、轉膜、雜交〔一抗分別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色。

　　.3 體外激酶測定 MycSSHL(WT)及其突變體MycSSHL(2 SA)分別轉染至MG63細胞，48 h后采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體?；厥誐ycSSHL，加入0.6 μg/ml重組活性CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 于 20 μl 激酶反應緩沖液中，30℃反應40 min。反應產物進行SDSPAGE電泳、轉膜，應用放射自顯影技術檢測32P 標記的SSHL水平。

　　.4 體外SSHL磷酸酶活性測定實驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉染至MG63細胞，48 h后，采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體?；厥誐ycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 于 20 μl 反應緩沖液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應2 h。反應產物進行SDSPAGE電泳、轉膜、雜交(一抗分別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體)、ECL顯色。

本公司更多產品優(yōu)惠:

大鼠肝脂酶HL抗體    2    轉化因子激活蛋白-2    AP-2 Transcription factor       神經絲蛋白抗體
大鼠高靈敏度促甲狀腺激素U-TSH抗體    22    鼠抗人Apoliprotein-D單克隆抗體    Apoliprotein-D       神經絲蛋白抗體（人）
大鼠高密度脂蛋白HDL抗體    23    鼠抗人Synuclein單克隆抗體    a-Synuclein        神經絲蛋白抗體
大鼠高敏甲狀腺素u-T4抗體    24    鼠抗人B淋巴細胞抗原單克隆抗體    B Lymphocyte Antigen 36kDa       整合素樣金屬蛋白酶與型(抗體)
大鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸u-T3抗體    25    鼠抗人Bax單克隆抗體    Bax      整合素樣金屬蛋白酶與型-7(抗體)
大鼠高遷移率族蛋白BHMGB-抗體    26    兔抗人Bax多克隆抗體    Bax      整合素樣金屬蛋白酶與型-7抗體 (N端抗體)
大鼠高鐵血紅蛋白MHB抗體     27    鼠抗人BCA-225單克隆抗體    BCA-225       整合素樣金屬蛋白酶與型-2抗體
大鼠睪酮T抗體    28    B細胞連接蛋白    B-Cell Linker  Protein(BLNK)        內收蛋白抗體