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所 在 地上海市
更新時間:2020-11-20 15:05:04瀏覽次數(shù):797次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線小鼠肝炎病毒探針法熒光定量 RT-PCR試劑盒 細(xì)胞株類
小鼠肝炎病毒探針法熒光定量 RT-PCR試劑盒 血清/培養(yǎng)基
性能指標(biāo):
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個月產(chǎn)品名稱:RT-PCR試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
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使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
?啶-2.6-二羧二甲酯 5453-67-8 0次 SureClone RACE Kit -20℃保存
5-溴戊酯 5454-83- 0次 SureClone eTS Core Kit -20℃保存
2-硝苯胺 5455-59-4 0次
N-(2,3-環(huán)氧丙基)鄰苯二 5455-98- 0次
N-乙基環(huán)己胺 5459-93-8 0次
-羥乙基-4-基哌 5464-2-0 套
甘油縮甲 5464-28-8 套
2-氨基-4-甲氧苯并噻唑 5464-79-9 7次
2-硝基亞氨基咪唑烷 5465-96-3 0次
2-甲氧基-5-硝基-6-基啶 5467-69-6 0次
2-氨基-4-溴苯乙酮 鹽鹽 5467-72- 套
2-氨基-4'-溴苯乙酮 2098049 000U p9 siRNA Binding Protein -20℃保存
溴化亞酮 54678-23-8 50次 p9 miRNA Detection Kit -20℃保存
4-氯-2-啶甲 5470-22-4 00次 EMSA Kit -20℃保存
2-基-4-硝基啶-N-氧化物 5470-66-6 50fpu rhAP (c-Jun) 4℃保存
RT-PCR試劑盒生素Ⅷ號培養(yǎng)基 規(guī)格: 0.ml Rat deoxypyridinoline,DPD
標(biāo)準(zhǔn)平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 0.ml Rat advanced glycation end products,AGEs
平板計數(shù)瓊脂 規(guī)格: 0.2ml Rat omentin
動力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格: 0.2ml Rat Vitamin A,VA
醋鉛培養(yǎng)基 規(guī)格: 0.2ml Rat Vitamin B2,VB2
EF-8瓊脂 規(guī)格: 0.2ml Rat Vitamin B6,VB6
雙岐桿菌生化基礎(chǔ)培養(yǎng)基 規(guī)格: 0.ml Rat Vitamin C,VC
營養(yǎng)瓊脂斜面 規(guī)格: 0.ml Rat Vitamin D,VD
月桂基鹽胰蛋白胨肉湯 規(guī)格: 0.ml Rat Vitamin D2,VD2
月桂基鹽胰蛋白胨MUG培養(yǎng)基 規(guī)格: 0.ml Rat Vitamin D3,VD3
EC肉湯 規(guī)格: 0.ml Rat Vitamin E,VE
新生素增菌肉湯 規(guī)格: 0.ml Rat Vitamin K,VK
mTSB肉湯 規(guī)格: 0.2ml Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA99
SD-39瓊脂 規(guī)格: 0.2ml Rat Pepsin,PP
乳糖肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格: ml Rat Motilin,MTL
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
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