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糖原PAS染色試劑盒使用說明

時(shí)間:2013/12/16閱讀:3226
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糖原PAS染色試劑盒是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯 示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基 底膜等。
   過碘酸(高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的 1,2-乙二醇基,使 之變?yōu)槎┡c Schiff 試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧 化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在即能把乙二 醇基氧化成醛基,又不至于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。
   本糖原PAS染色試劑盒的特點(diǎn);采用森貝伽*配方技術(shù),大大增強(qiáng)了染色效果; 性能穩(wěn)定,特異性強(qiáng);操作簡(jiǎn)捷,僅需 1h。
糖原PAS染色試劑盒產(chǎn)品組成:
編號(hào)
  SBJ0005
  SBJ0005
  SBJ0005
 STORAGE
試劑(A): 過碘酸水溶液
 50ml
 100ml
 500ml
 4℃
試劑(B): Schiff 試劑
 50ml
 100ml
 500ml
 4℃
試劑(C): Lillie-Mayer *
 50ml
 100ml
 500ml
 RT
試劑(D): 鹽酸乙醇分化液
 50ml
 100ml
 500ml
 RT
使用說明書1 份
糖原PAS染色試劑盒主要成分:
試劑(A): 主要由 1%過碘酸組成。
試劑(B): 主要由堿性品紅、偏重亞硫酸鈉、活性碳等組成。
試劑(C): 主要由蘇木素、乙醇等組成。
試劑(D): 主要由 1%鹽酸、乙醇等組成。
糖原PAS染色試劑盒自備試劑:
1、蒸餾水或去離子水
2、95%乙醇
3、無水乙醇
4、封片劑
操作步驟(僅供參考):
1、常規(guī)固定,常采用 10%的福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。
2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片入蒸餾水。
3、自來水沖洗 2~3min,再用蒸餾水浸洗 2 次。
4、置于試劑(A)中,室溫放置 5~8min,一般不宜超過 10min。
5、自來水沖洗 1 次,再用蒸餾水浸洗 2 次。
6、 樣本放入 森貝伽 試劑(B),置于室溫陰暗處,浸染 l0~20min。
7、 自來水沖洗 10min。
8、樣本置于試劑(C)中,染核 1~2min。
9、試劑(D)分化。
10、自來水沖洗 l0~15 分鐘后,更換雙蒸水清洗,使其返藍(lán)。
11、逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。
12、二甲苯透明。
13、中性樹膠封固。
糖原PAS染色試劑盒染色結(jié)果:
PAS 反應(yīng)陽性物質(zhì)(糖原或多糖)均呈紅色或紫紅色;細(xì)胞核呈藍(lán)色;細(xì)胞 質(zhì)、肌纖維、膠原纖維等呈深淺不一的紅色;其顏色深淺取決于樣品在高碘酸和 Schiff 試 劑中作用時(shí)間的長(zhǎng)短。
糖原PAS染色試劑盒注意事項(xiàng):
1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。
2、過碘酸氧化時(shí)間不宜過久,氧化時(shí)的溫度以 18-22℃*,其 PH 應(yīng)在 3~5 之間。
3、試劑(A)與試劑(B)應(yīng)置于 4℃,密閉保存,使用時(shí)避免接觸過多的陽光和空氣,
4、試劑(A)與試劑(B)使用前,提前 30min 取出恢復(fù)到在室溫后,避光暗處使用。
5、森貝伽* Schiff 試劑在室溫過低(小于 15℃)情況下,反應(yīng)緩慢,可以置于適宜溫水
(小于 30℃)中恢復(fù)后再使用。
6、鹽酸乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,其分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和鹽酸乙 醇分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠。
7、在高碘酸和 Schiff 試劑中作用時(shí)間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織的類別等決定。
8、本試劑盒常用于組織切片染色,對(duì)于真菌、細(xì)胞、極其薄的切片,建議采購 森貝伽 SBJ0006 糖原 PAS 染色試劑盒(細(xì)胞真菌),因?yàn)槠涓叩馑崛芤汉吞K木素溶液濃度 更低,不宜過染。
9、冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。
10、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
11、使用場(chǎng)所應(yīng)通風(fēng),并遠(yuǎn)離火源。
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸,試劑(A)、試劑(B)應(yīng)置于 4℃,避光保存,回復(fù)至室溫后使用。試劑 (C) 、試劑(D),密閉,室溫保存。6 個(gè)月有效。

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