江萊生物-中國老牌試劑供應(yīng)商作者
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。
兔胎盤生長因子(PLGF)定量檢測試劑盒(ELISA)
使用說明書
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒試劑盒名稱】
兔胎盤生長因子(PLGF)定量檢測試劑盒(ELISA)
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒試劑盒用途】
定量檢測兔血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胎盤生長因子(PLGF)的含量。
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒檢測原理】
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準品、待測樣本加入到預(yù)先包被兔胎盤生長因子(PLGF)單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中兔胎盤生長因子(PLGF)濃度呈正相關(guān),450nm波長下測定OD值,根據(jù)標(biāo)準品和樣品的OD值,計算樣本中兔胎盤生長因子(PLGF)含量。
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒試劑盒組成】
1 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 7 | 顯色劑A液 | 6mL |
2 | 標(biāo)準品 | 0.3mL×6管 | 8 | 顯色劑B液 | 6mL |
3 | 20倍濃縮洗滌液 | 25mL | 9 | 終止液 | 6mL |
4 | * | 6mL | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 特殊稀釋液 | 6mL | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 酶標(biāo)試劑 | 6mL | 12 | 密封袋 | 1個 |
備注:標(biāo)準品(1號→6號)濃度依次為:80、40、20、10、5、2.5 ng/L.
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒需要而未提供的試劑和器材】
1、
2、標(biāo)準規(guī)格酶標(biāo)儀
3、精密移液器及一次性吸頭
4、蒸餾水
5、一次性試管
6、吸水紙
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒操作步驟】
1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標(biāo)準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準品孔中加入標(biāo)準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加*40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。
4、溫育:
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對照孔不加。
7、溫育:
8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),
10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12、計算:根據(jù)標(biāo)準品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標(biāo)準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒樣本要求】
1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
2、標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒注意事項】
1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準。
2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
3、建議所有的標(biāo)準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
5、本試劑盒定量范圍為2.5-80ng/L,超過此范圍,為標(biāo)準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結(jié)果(2.5-80ng/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時間。
7、為避免交叉污染,標(biāo)準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、*和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。
8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。
9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒操作程序總結(jié)】
準備試劑,樣品和標(biāo)準品
計算
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒檢測范圍】
2.5ng/L – 80ng/L
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒規(guī)格】
96人份/盒
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒貯藏】
2
【兔胎盤生長因子(PLGF)Elisa試劑盒有效期】
6個月
本公司為國內(nèi)試劑盒供應(yīng)商之一,質(zhì)量保證。
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型號:JLDS-L50
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型號:ZJD-C-10Z