隨著分子生物學芯片技術研究工作的進一步深入開展，DNA芯片技術已經被逐漸應用于對生物樣品中的各種已知或未知的核酸序列表達的檢測和比較研究。但是，作為生物體細胞中實施化學反應功能成分的蛋白質，其相當部分與活性基因所表達的mRNA之間未能顯示出直接的關系，因此使作為高通量基因表達分析平臺的cDNA芯片技術的應用過程受到一定的限制。另外，由于蛋白質結構和構象方面的各種微小的化學變化均能引起活性或功能的改變，為了進一步揭示細胞內各種代謝過程與蛋白質之間的關系以及某些疾病發(fā)生的分子水平的機制，必須對蛋白質的功能進行更深入的研究。隨著DNA芯片技術的不斷成熟以及基因研究所取得的令人矚目的成果，進一步推動了蛋白質功能的研究及其相關技術的發(fā)展，蛋白芯片技術也就應運而生。

蛋白芯片技術的基本原理是將各種蛋白質有序地固定于滴定板、濾膜和載玻片等各種載體上成為檢測用的芯片，然后，用標記了特定熒光抗體的蛋白質或其他成分與芯片作用，經漂洗將未能與芯片上的蛋白質互補結合的成分洗去，再利用熒光掃描儀或激光共聚焦掃描技術，測定芯片上各點的熒光強度，通過熒光強度分析蛋白質與蛋白質之間相互作用的關系，由此達到測定各種蛋白質功能的目的。為了實現這個目的，首先必須通過一定的方法將蛋白質固定于合適的載體上，同時能夠維持蛋白質天然構象，也就是必須防止其變性以維持其原有特定的生物活性。另外，由于生物細胞中蛋白質的多樣性和功能的復雜性，開發(fā)和建立具有多樣品并行處理能力、能夠進行快速分析的高通量蛋白芯片技術將有利于簡化和加快蛋白質功能研究。

在多年的蛋白芯片技術的研究過程中，研究者為了尋找合適的物質作為蛋白的載體進行了不懈的探索。例如日本學者利用含有陽離子表面活性劑（HTAB）脂質體作為載體，通過戊二醛作用使其與一種鐵蛋白包裹外殼的成分結合組裝制備成一種納米水平的裝配體，這種裝配體可以在適當的pH條件下使鐵蛋白分子進入并固定于包裹外殼內面，形成蛋白質的載體。有人利用某些固體表面或覆蓋上含有電解質的薄膜作為載體，可以將膠體蛋白質顆粒成分轉移至薄膜上形成蛋白芯片。Uetz等在分析啤酒酵母基因組序列全長度閱讀框架編碼各種蛋白質的相互作用時，使用不同孔數的平板作為載體，建立了約含有6 000個酵母轉化株組成的平板蛋白芯片系統(tǒng)，平板上的每一個小孔中含有一個酵母轉化株，可以根據其活性功能區(qū)開放閱讀框架的編碼表達生成一種蛋白質，這個系統(tǒng)可以用于蛋白質功能的檢測和分析。Arenkov等利用聚丙烯酰胺凝膠板作為支持物，將蛋白樣品置于凝膠上，然后經過電泳分離，使其成為蛋白的陣列用于進一步的研究。zui近，哈佛大學蛋白芯片研究中心Gavin等利用制備DNA芯片的高精密度機械手的針狀點樣槍頭在只有顯微鏡載玻片一半大小的玻片上，制備了第1張含有樣品點數為10 800的蛋白芯片。這張芯片用已純化的蛋白G按每點為1納升的點樣量點樣10 799次，另一次用FRB（FK-BRl2—rapamycinbinding domain Of FKBP-rapamycin-associatedprotein）點樣。為了確保不同分子量的點樣蛋白質都能夠被固定在玻片上，他們首先在玻片表面涂上BSA，然后使用N，N，—二琥珀酰胺碳酸（N，N’—disuccinimidyl carbonate）激活BSA表面的賴氨酸、天冬氨酸和*殘基成為BSA-NHS玻片，其作用是促進BSA與點樣蛋白質的結合而使蛋白質被固定于玻片上。在制備芯片過程中，為了保證被固定在載體上的蛋白質依然保持天然的構象和生物學活性，他們在蛋白質點樣的磷酸鹽緩沖液中加入40％的甘油，以防止因水分的蒸發(fā)而造成蛋白質變性。點樣后再經3h的溫浴并將芯片浸泡于含有小牛血清蛋白（BSA）的緩沖液中，使芯片表面含有一層小牛血清蛋白，用于封閉與其他蛋白質產生非特異性結合的部位及在表面未參加反應的醛基。為了檢測芯片的應用，他們用不同熒光抗體分別標記能與蛋白G和FRB特異結合的IgG和FKBPl2（12Kd FK506—bindingprotein）并作用于蛋白芯片，觀察這些蛋白質與蛋白芯片的相互作用，其結果清晰地顯示芯片上的蛋白G和單一的FRB點樣分別被標上藍色和紅色熒光。該實驗研究建立了蛋白質樣品微量點樣技術并使蛋白質固定于載體上時能夠保留原有的構象和生物學活性，這為今后對蛋白質多樣品的并行研究或快速分析——為制備高通量功能檢測的蛋白芯片奠定了技術基礎。