上海銳谷生物科技有限公司作者
為正確地得到特征物在三維空間內長度和表面積等,必需對其做方向性隨機抽樣。如果特征物在三維空間內各個方向均勻分布,即具有各向同性,如腎小體的毛細血管球,可通過組織作任意方向切片,然后在切片上進行二維研究,通過所得二維數據推斷特征物的三維結構信息。如果特征物在三維空間內呈各向不同性分布,則需通過組織制作各向同性切片,并在其中獲取數據。制作各向同性切片的方法有定向法(orientator)和球切法(isector)。
球切法:采用有圓形小腔的塑料模具,將組織塊放人小腔內包埋,使包埋介質(如樹脂)充滿小腔,包埋介質變硬后形成球形包埋塊。把球形包埋塊取出,在平面上任意滾動,然后對組織塊按常規(guī)電鏡包埋方法包埋。“球切法”原理頗為簡單,利用球面的各向同性特征,在平面上任意滾動球形包埋塊,相當于用“盲法”隨機確定球面上一個均勻隨機點,由此確定空間內一個均勻隨機方向。但是,“球切法”需要專門包埋模具,而且僅適用于體積較小的組織塊。
球切法模具圖
圖左側顯示一個特殊制作的模具,模具上的數字指示其深處有球形的腔。圖中部顯示一個彎曲的模具,可見球形腔的蓋子已被切開,標本放人球形腔內。然后用包埋介質充填小腔。包埋介質變硬以后,包埋的標本則形成球形。在zui上方的腔內在一個球形的包埋標本。圖右側顯示球形包埋標本的放大圖像
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