当着夫的面被夫上司玩弄,最近免费中文字幕中文高清百度 ,超碰CAOPORON入口,精品国产日韩一区二区三区

技術(shù)中心

您現(xiàn)在的位置:環(huán)保在線 > 技術(shù)首頁(yè) > 技術(shù)交流

熱穩(wěn)定腸毒素(ST)的快速檢測(cè)與鑒定

2010年12月03日 09:55:03人氣:1445來(lái)源:上海銳谷生物科技有限公司

天然的ST為小分子質(zhì)量多肽,無(wú)免疫原性,以往只能用乳鼠胃內(nèi)投服試驗(yàn)檢測(cè)之。近些年來(lái),用偶聯(lián)法使ST獲免疫原性而成功地研制出相應(yīng)抗體,一系列快速檢測(cè)ST·的免疫學(xué)方法也隨之形成。現(xiàn)將部分方法簡(jiǎn)介如下。

 
    (1)ELISA檢測(cè)ST  De.Mai等(1983)以過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗體,用抗原競(jìng)爭(zhēng)間接法檢測(cè)培養(yǎng)液中STl。定性檢測(cè)時(shí)底物用5—氨基水楊酸,定量時(shí)用鄰苯二胺。此法與乳鼠試驗(yàn)的相符率為96.7%,無(wú)假陽(yáng)性。‘Thompson等(1984)建立了一種快速ELISA,經(jīng)提高酶標(biāo)記抗體濃度和競(jìng)爭(zhēng)作用溫度以及減少底物用量后,可使檢測(cè)ST的時(shí)間縮短至lh。當(dāng)用單抗時(shí),該法對(duì)ST的檢出限可達(dá)3pg/m1。Klipstein等以人工合成的ST(s)和ST(c)分別與豬IgG偶聯(lián)后,并制成兔和羊抗ST血清,還以此建立了檢測(cè)ST的雙夾心ELISA。該法*抗體為兔抗ST血清,第二抗體用羊抗ST血清。如用純化的抗ST(c)抗體作為*抗體、第二抗體,則對(duì)ST檢測(cè)限為140pg/m1,比下降為乳鼠法的1/280,比粗制ST(s)抗體的檢測(cè)敏感性增高2857倍,對(duì)50株人源ST陽(yáng)性檢出率為100%,無(wú)一假陽(yáng)性。本法還可檢測(cè)豬源ST。
 
    (2)放射免疫法  Giannetla等(1981)以改良的過(guò)氧化物酶法標(biāo)記純化STl,用抗原競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)待檢菌培養(yǎng)上清液中的STl,其檢測(cè)限為50pg/m1的STl,特異性強(qiáng),重復(fù)性亦好,不同時(shí)間測(cè)定的誤差不大于5%,對(duì)STl和胃腸道多肽均無(wú)交叉反應(yīng)。Frant等將豬源菌株431所產(chǎn)的ST與牛血清白蛋白或血藍(lán)蛋白偶聯(lián)后,制成兔抗ST血清,另以125I標(biāo)記的該菌株ST作為檢測(cè)標(biāo)記物,通過(guò)待檢ST對(duì)標(biāo)記物的競(jìng)爭(zhēng)抑制來(lái)測(cè)定樣品中ST含量,其檢測(cè)限達(dá)50pg每反應(yīng)管,整個(gè)試驗(yàn)可在一天內(nèi)完成。此法可檢測(cè)豬、牛和人源的STl,對(duì)IrT及STl均無(wú)反應(yīng),且對(duì)STl的定量與乳鼠法所得的結(jié)果呈高度相關(guān)。
 
    (3)GMl—ELlSA  Svennerhotm等研制出抗STl的單抗,并以此建立了檢測(cè)ST的GMl—ELISA。其主要步驟為將ST與CT的B亞單位(CT-B)偶聯(lián),再把偶聯(lián)物結(jié)合到用GMl包被的酶標(biāo)板上,將待檢樣品和ST標(biāo)準(zhǔn)樣品分別稀釋后,再各自與抗ST單抗在室溫下作用1h,加入上述板孔中,再加入HRP標(biāo)記的抗鼠免疫球蛋白,顯色,測(cè)OD值。如待檢菌株培養(yǎng)液濾液能≥50%抑制抗ST單抗與GMl—ST-CTB結(jié)合反應(yīng)即判為陽(yáng)性。通過(guò)與陽(yáng)性反應(yīng)的ST標(biāo)準(zhǔn)的稀釋度做比較還可確定樣品中ST的濃度。此法既能檢測(cè)ST 1a,又可檢測(cè)STl,對(duì)純化ST的檢測(cè)限為0.2~0.4ng,其敏感性高于乳鼠試驗(yàn)。但對(duì)乳鼠法中呈陽(yáng)性反應(yīng)的腸結(jié)腸炎耶爾森菌的ST卻不起反應(yīng)。
全年征稿/資訊合作 聯(lián)系郵箱:hbzhan@vip.qq.com
版權(quán)與免責(zé)聲明
1、凡本網(wǎng)注明"來(lái)源:環(huán)保在線"的所有作品,版權(quán)均屬于環(huán)保在線,轉(zhuǎn)載請(qǐng)必須注明環(huán)保在線,http://www.yixinui.com。違反者本網(wǎng)將追究相關(guān)法律責(zé)任。
2、企業(yè)發(fā)布的公司新聞、技術(shù)文章、資料下載等內(nèi)容,如涉及侵權(quán)、違規(guī)遭投訴的,一律由發(fā)布企業(yè)自行承擔(dān)責(zé)任,本網(wǎng)有權(quán)刪除內(nèi)容并追溯責(zé)任。
3、本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其它來(lái)源的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)或證實(shí)其內(nèi)容的真實(shí)性,不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
4、如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
我要投稿
  • 投稿請(qǐng)發(fā)送郵件至:(郵件標(biāo)題請(qǐng)備注“投稿”)hbzhan@vip.qq.com
  • 聯(lián)系電話(huà)0571-87759680
環(huán)保行業(yè)“互聯(lián)網(wǎng)+”服務(wù)平臺(tái)
環(huán)保在線APP

功能豐富 實(shí)時(shí)交流

環(huán)保在線小程序

訂閱獲取更多服務(wù)

微信公眾號(hào)

關(guān)注我們

抖音

環(huán)保在線網(wǎng)

抖音號(hào):hbzhan

打開(kāi)抖音 搜索頁(yè)掃一掃

視頻號(hào)

環(huán)保在線

公眾號(hào):環(huán)保在線

打開(kāi)微信掃碼關(guān)注視頻號(hào)

快手

環(huán)保在線

快手ID:2537047074

打開(kāi)快手 掃一掃關(guān)注
意見(jiàn)反饋
邓州市| 楚雄市| 东宁县| 合江县| 买车| 绥江县| 澄江县| 灌南县| 扎鲁特旗| 甘泉县| 淄博市| 全椒县| 汨罗市| 河北省| 南康市| 邯郸市| 桂林市| 墨竹工卡县| 吴堡县| 无极县| 沁源县| 建湖县| 进贤县| 铜梁县| 昭苏县| 正宁县| 渭南市| 桑植县| 宁化县| 沧州市| 海原县| 宁明县| 青浦区| 邳州市| 兴和县| 米林县| 厦门市| 永仁县| 宝清县| 延川县| 房产|