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用于沙門氏菌分析的傳統(tǒng)方法是食物樣品分步增菌,以增加病原的可檢出率,這種培養(yǎng)方法總體可分4個(gè)不同階段或步驟。*步(預(yù)增菌),將樣品加到一種高營(yíng)養(yǎng)、無(wú)選擇性的培養(yǎng)基中,溫度37℃,使那些“致傷”的細(xì)菌復(fù)蘇及使所有微生物生長(zhǎng)。雖然緩沖胨水被建議常規(guī)使用(由于其可保持溶液pH值穩(wěn)定),但對(duì)培養(yǎng)基的選擇仍存有爭(zhēng)論。
第二,是選擇性增菌步驟,它使沙門氏菌生長(zhǎng)而使肉湯中同時(shí)存在的微生物數(shù)量減少,與預(yù)*相似,對(duì)選擇性培養(yǎng)基的選擇,也存在許多不同的觀點(diǎn)。目前應(yīng)用的主要有如下3種類型:連四硫基鹽肉湯(Tetrathionatebroth)、硒酸鹽*肉湯(Selenitecystinebroth)和RV(Rappaport-Vassiliadis)培養(yǎng)基。由于沒(méi)有任何一種培養(yǎng)基可以全面地保持所有食品基質(zhì)或各種沙門氏菌血清型,所以,較適當(dāng)?shù)淖龇ň褪鞘褂脙煞N培養(yǎng)基平行地進(jìn)行試驗(yàn)。
第三步是分離步驟,即選擇性培養(yǎng)物在含一種或多種抑制非沙門氏菌生長(zhǎng)制劑的瓊脂平板上劃線培養(yǎng),然后對(duì)平板上肉眼可見(jiàn)的特征性菌落進(jìn)行確認(rèn),并對(duì)該菌落分離物進(jìn)行一系列生化和血清學(xué)檢測(cè),以作出鑒定。傳統(tǒng)沙門氏菌檢測(cè)法全過(guò)程需時(shí)至少4~7天,才能得出明確的診斷結(jié)果。
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