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生化實驗室常用儀器操作一覽

2011年03月08日 15:07:46人氣:1971來源:金壇市梅香儀器有限公司

 
【冷凍真空干燥機】

 

基本原理
高真空狀態(tài)下,利用升華原理使預先凍結的物料中的水份直接從冰態(tài)升華為水蒸汽而被除去,從而使物料干燥。真空冷凍干燥廣泛應用于多種產品,可確保物品中蛋白質、維生素等各種營養(yǎng)成份,特別是那些易揮發(fā)熱敏性成份不損失,因而能zui大限度地保持原有的營養(yǎng)成份。還能有效防止干燥過程中的氧化,可以避免營養(yǎng)成份的轉化和狀態(tài)變化。凍干制品呈海綿狀、無干縮、復水性好、含水份極少,相應包裝后可在常溫下長時間保存和運輸。

操作步驟
1、系統(tǒng)準備
檢查系統(tǒng)是否清潔和干燥,真空泵與冷凍機是否連接,接通電源,檢查排氣口、冷凍管的密封性。
2、加樣
樣品需要預冷到至少-40℃,可以在深低溫冰箱(-70℃)或者液氮(-196℃)中進行。打開密封管開關,搬開冷凍艙,將樣品置于冷凍艙里的隔板上。關閉密封管開關。
3、冷凍
打開冷凍開關,等待20~30分鐘,直到冷凍艙的溫度低于-40℃。
4、抽真空
打開真空泵開關,等待10~15分鐘,直到系統(tǒng)壓力低于100 millitorr。
5、監(jiān)控過程
確保系統(tǒng)參數(shù)(冷凍溫度、真空壓力)在正常范圍內;
定期檢查冷凍艙中的結冰情況,決定是否要除霜;
觀察樣品是否干燥*,一般干燥過程需要24~72小時,視具體樣品通過目測而定。
6、關閉系統(tǒng)
關閉總開關,接上排氣管或打開密封管開關以解除真空狀態(tài)。
關閉真空開關,關閉冷凍開關,取出樣品。
7、系統(tǒng)維護
除霜:冷凍艙下面的壓縮艙內如果有霜,則接上排水管,然后用少量熱水(不能超過壓縮艙容積的一半)促進冰霜的融化。不能通過敲擊冰塊來除霜。
除濕:壓縮艙、冷凍艙、真空泵壓縮機以及墊圈等表面的水霧均需擦干。
清潔:壓縮艙、冷凍艙可以用溫和的去污劑或蘇打水來清洗,然后干燥并撤去排水管,并重新密封排水孔。
泵油:定期檢查油位,排除油霧。
 
注意事項
1、樣品要保持冷凍,不能“回融”。
大多數(shù)溶劑的冰點高于-40℃,所以冷凍艙溫度低于-40℃可以使一般樣品保持冰態(tài)。
為確保樣品不“回融”,可將冰凍的樣品制成小于20 mm的小塊。
2、有毒或有腐蝕性的樣品。
不要用來冷凍干燥,如果一定要用,則更加需要系統(tǒng)維護,并需要另外定購特定的濾器以保護真空泵。
3、真空泵油需保持干凈。
微黃或無色的油是干凈的,顏色變深表示有酸污染,霧狀渾濁表示有水污染。有污染時需要更換好油。
 
【自動雙重蒸餾水器】
 
操作說明
1.擰開自來水,讓水流開始較為細小,觀察*管水位超過石英加熱管;
2. 接通電源,按下*管的ON開關,這時水速仍以細小為主,等待*管內自來水沸騰,這時候將水流逐漸調大至適中程度;
3. 等待第二管內自來水超過石英加熱管,按下第二管的ON開關,第二管隨即加熱,注意觀察兩個管子的水位變化,及時做出調整。
4.一般來說有下面三種情況:
a→*管水位過高,接近水蒸氣散出口,這時宜將調整水位的橡膠管放置低于玻璃管位置,待自來水流出至適當位置,將橡膠管回復原位;
b→*管水位過低,調整自來水加大進水,或者調節(jié)橡膠管上控制開關加大進水,乃至關閉電源待進水到適當位置,重新打開電源,繼續(xù)蒸餾。
C→第二管水位過低,按下第二管的OFF開關,待水位升高超過石英加熱管時再開始蒸餾。
5. 雙蒸結束,先關閉控制面板上OFF兩個電源,然后關自來水。
 
【3560C高壓鍋】
 
操作程序
 
1.打開鍋蓋,倒入蒸餾水,滿至WATER LEVEL,以后每次使用時,必須補足水滿到WATER LEVEL。
2.把插頭插上電源,按電源開關ON,顯示器指示燈亮起,機器開始進行程序自檢。
3.按顯示屏的提示輸入工作密碼。
4.放置待滅菌的物品入滅菌室,并旋緊鍋蓋。
5.根據所高壓物品的不同,按過程選擇鍵1-6中的某一數(shù)字選擇不同的滅菌流程。一般固體滅菌選擇按鍵4,液體滅菌選擇按鍵5。特殊要求的,可以先按下MODE鍵,輸入工作密碼。選擇要重新設置的項目進行修改。
6.按啟動鍵START鍵,即開始此滅菌模式。
NOTE:須待機器進入正常運行程序后,人方可離開。
7.當滅菌流程結束時,響鈴鳴叫30秒。
8.確認壓力顯示器的壓力降為0以后,把鍋門把手旋松,讓殘余蒸氣釋出,待5-10分鐘后推開跨桿,準備取出滅菌物品。如需高壓另一鍋,則需重新加水滿到WATER LEVEL,同時處理廢水收集瓶中的廢水。
9.在高壓鍋使用記錄上進行登記。

 
【PK-121R離心機】
 
 操作步驟:
1、將離心機打開,儀器此時的工作狀態(tài)為zui后操作設置的參數(shù)。
2、平衡離心管,兩兩對稱放入離心機。
3、蓋好離心蓋,蓋子鎖上時才能離心。
4、選擇操作模式:
 設置參數(shù):1)離心速度:300rpm~14000rpm;2)離心時間:1min~99min;
3)離心溫度:-10℃~40℃;4)zui低加速度:1~5個,1zui慢
 5)zui低減速度:0~4 coast-down,(0是慣性)
(1)手工模式:不重新設置時,按上次設置的參數(shù)離心,可以重新設置參數(shù)離心。
(2)程序模式:可預先設置5個程序儲存,不同的程序按不同的序號,相應的指示燈亮,再按另外的序號可以選另外的程序。
(3)瞬時(MOM)操作模式:持續(xù)按MOM鍵,可使離心達到zui大速度和zui大加速度,當放開時離心減慢直到停止,離心時顯示的時間是已經用了的時間(以秒計數(shù))。
5、按START鍵,開始離心,綠燈亮。此時顯示實際的離心速度和溫度,時間為剩余時間。
6、當設置時間到,離心機通過制動裝置自動停止離心,黃燈亮,可以打開離心蓋。

如何設置相應參數(shù)?
1、用”key-programe”取消錯選的程序。
2、用“SOFT ACL”鍵設置加速度:高加速燈滅,低加速燈亮;按住鍵3秒,燈閃爍,用設置離心速度的鍵選擇1~5
3、用“SOFT DCL”鍵設置加速度:高減速燈滅,低減速燈亮;按住鍵3秒,燈閃爍,用設置離心速度的鍵選擇0~4
4、設置離心溫度、速度和時間:當“SET”燈閃爍時,可以改變參數(shù),用箭頭鍵選擇。設置后3秒,燈停止閃爍,自動確認。
如何記憶一個程序?
1、在設置的參數(shù)閃爍時,按程序鍵1~5,當程序鍵旁的燈亮時,參數(shù)被儲存。
2、保護程序不被修改:可以在參數(shù)閃爍時,按一個程序鍵的同時按下“LOCK PROG(STOP)”鍵。取消保護時再次按程序鍵同時按下“LOCK PROG(STOP)”鍵。
警告信息:
1、END:在每次離心循環(huán)結束時顯示,在進行下一次操作時顯示設置得參數(shù)。
2、LID:當離心開始而蓋子沒蓋緊時顯示,并報警。
3、IMBAL:當離心物品不平衡時顯示,并報警。
4、MAIMS:當動力系統(tǒng)出錯時顯示。
5、OVERT:當離心室里的溫度>45℃時顯示。
6、SET:當設置速度大于zui大離心速度時顯示。
注意事項:
1、離心時不要移動或轉動儀器。
2、不要使用說明書不允許使用的轉子和附屬物。
3、不能超過zui大轉速。
4、不使用不適合離心的管子或瓶子。
5、不在儀器周圍放置危險品。
6、不使用易燃易爆物。
 
【雜交爐】

操作步驟
1、設置溫度
按一下up或down鍵,顯示屏將由亮到暗開始閃爍,此時顯示的是上次設置的溫度。如需改變,則通過up或down鍵來上調或下調。停按5秒鐘后,數(shù)字停止閃爍,并開始顯示爐內溫度。(*次使用前需要至少24小時來穩(wěn)定加熱器。)
2、校準
需要校準顯示溫度與實際溫度是否一致。將一枝標準溫度計置于樣品附近,穩(wěn)定1小時后,比較2者的數(shù)值是否一致。
如需校準,則同時按住up和down鍵直到顯示屏上數(shù)字中前后2個小數(shù)點開始閃動,然后用up或down鍵來改變數(shù)值,使其與溫度計的參考數(shù)值一致。再次穩(wěn)定加熱器。
3、轉速調節(jié)
轉動開關有3個位置,上位表示開,其轉速可在0~15 RPM之間調節(jié);中位表示關;下位表示短時間轉動,按住才轉動松開即關。
維護
使用前后觀察系統(tǒng)是否清潔,如果不是,則需要清洗。
1、顱腔
用肥皂和水進行清洗,然后干燥。如有污染,則用適當?shù)南緞┣逑?,注意不要用含氯漂白劑,否則容易造成損壞。
2、接水盤和旋轉架
先取下來,然后用同樣的溶液進行清洗。
 
【Moder 583型干膠儀】
 
操作步驟
1.將干膠儀的排水管連接到真空泵上,閥門旋到開的位置。
2.打開電源開關。
3.選擇干膠CYCLE:
a.按CYCLE健兩次;
b.當燈在閃動狀態(tài)時,按RAISE或LOWER健選擇干膠CYCLE。
4.  選擇循環(huán)溫度:
a.按TEMP鍵兩次;
b. 當燈在閃動狀態(tài)時,按RAISE或LOWER健選擇溫度。
5.選擇循環(huán)時間:
a.按TIME鍵兩次;
b. 當燈在閃動狀態(tài)時,按RAISE或LOWER健選擇時間。
6.將膠放在干膠儀里(將膠放在透明的保護蓋的下面,在膠的表面覆蓋一層塑料薄膜)。
7.打開真空泵。
8.按START鍵開始干膠程序。
9.干膠程序完成后,打開透明的保護蓋,閥門旋到開的位置,然后關掉真空泵。
干膠時間的選擇

 

膠的濃度                膠的厚度              80℃所需時間
3%至20%                 0.375mm        30min
3%至20%                 0.5mm                  40min
3%至10%                 0.75mm                 40min到60min
10%至20%                0.75mm                 60min到120min
3%至10%                 1.5mm                  45min到60min
10%至20%                1.5mm                  60min到120min
3%至10%                 3mm                    60min到120min
10%至20%                3mm                    120min到180min

 

 
 
【Leica熒光顯微鏡】
 
簡要操作步驟
1.打開12V/100W Leica的電源開關,至少預熱10分鐘。
2.打開顯微鏡的電源開關。
3.放置樣品,調好放大倍數(shù)、焦距和視野。
4.移動light stop至     。
5.滑動filter block至相應光路。
6.將光線調節(jié)旋鈕調到zui小。
7.鏡下觀察樣品的熒光染色情況。
8.如果樣品有微紅色背景,可以將BG 38 filter移動至     ,以消除背景色的干擾。
9.如要拍照,需將相機與顯微鏡連接,將顯微鏡上的拉桿拉出,這時在相機上可直接觀察樣品的熒光染色情況,并拍照保存。
10.結束后,關掉顯微鏡和12V/100W Leica的電源開關。
 
 
【PCR儀】
 
操作步驟

 

-RUN       ENTER
PROGRAM  PROGRAM

 

1、開機:打開開關,視窗上顯示“SELF TEST”,顯示10秒中后,顯示RUN-ENTER菜單:準備執(zhí)行程序。
2、放入樣本管,關緊蓋子。
3、如果要運行已經編好的程序,則直接按《Proceed》,用箭頭鍵選擇已儲存的程序,按《Proceed》,則屏幕顯示:

 

-ENABLE      DISABLE
heated  lid

 

按《Proceed》選擇ENABLE,則開始執(zhí)行程序。

 

-NEW     LIST
EDIT     DELET

 

4、如果要輸入新的程序,則在RUN-ENTER菜單上用箭頭鍵選擇ENTER PROGRAM,按《Proceed》,屏幕顯示            

 

Step 1      _TEMP
GOTO   Opiton   End

 

按《Proceed》,1)選擇NEW,命名新的程序,zui多8個字母,輸入后按《Proceed》確認(如何輸入字母、數(shù)字)。
2)輸入程序步驟:名字輸入后,顯示                     
按《Proceed》則可以輸入溫度(0~100℃),按《Proceed》確認后,則可以輸入孵育時間,用《Select》鍵移動光標,輸入數(shù)字,完成后按《Proceed》確認,跳到下一步,輸入方式同上。
3)選擇GOTO,輸入循環(huán)步驟時鏈接到第幾步(循環(huán)數(shù)zui多可達9999次)(為實際循環(huán)數(shù)-1)。

 

Step    extend
Increment  slope

 

4) 選擇option,再選擇increment,按《Proceed》確認,輸入初始的溫度,確認后輸入時間,按《Proceed》確認,然后輸入每個循環(huán)增加或減少的溫度,增加用正值,減少用負值(-0.1℃~6℃),按《Proceed》確認。
選擇extend, 按《Proceed》確認,輸入每個循環(huán)增加或減少的時間(-60~60秒),按《Proceed》確認。
選擇slop(指溫度上升或下降的速率),輸入溫度的改變值(-0.1~1.5℃)按《Proceed》確認,然后輸入加熱或致冷的速度,按《Proceed》確認。
4)選擇End,輸入結束步驟。
5、輸入完成的程序后,到RUN-ENTER菜單,選擇新程序,開始運行。
6、其它:用《pause》可以暫停一個運行的程序,再按一次繼續(xù)程序。
用《stop》或《Cancel》可停止運行的程序。
編輯程序:
1、可以用《Cancel》鍵刪除輸錯的值,輸入新的值后按《Proceed》確認。
2、對于未輸完的程序,要先輸入END,按《Proceed》將程序儲存后才能刪除。
3、刪除已經儲存的程序:從RUN-ENTER菜單中選擇RUN-PROGRAM,按《Proceed》,顯示主菜單,選擇DELET,用《Select》選擇刪除。
4、查看程序的步驟:在主菜單上選擇LIST,按《Proceed》,用《Select》將選擇名稱,再按《Proceed》,顯示程序的*步,用《Select》鍵向前、向后翻頁查看,此時不能改變程序的值。

編輯已有的程序:
1、從RUN-ENTER菜單中選擇RUN-PROGRAM,按《Proceed》,顯示主菜單,選擇EDIT,按《Proceed》確認,用《Select》鍵選擇要編輯的程序,按《Proceed》顯示程序的*步。
2、用《Select》鍵將光標移到要改變的溫度或循環(huán)的值上,鍵入新值,按《Proceed》確認,按《Cancel》刪除鍵入的值,出現(xiàn)空格,鍵入新值后確認。
注:一旦值被改變或刪除,原來的值不能恢復,必須重新鍵入。
3、編輯時間值:必須重新鍵入小時、分鐘、秒,按《Proceed》。

 
如何設置一個PCR體系:
一般分為8步:
1、預變性:可用94~95℃,2~10min,一般用5min。
2、變性:一般用94℃,30s~2min,一般45s~1min。
3、退火:溫度自定,30s~2min。
4、延伸:70~75℃,一般72℃,對于<2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。
5、循環(huán)數(shù):一般25~35個循環(huán)。
6、zui終延伸:72℃,5~15min。
7、保存:10℃,時間設為0。
8、END。


 
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