⑵分離培養(yǎng)與鑒定

①定量細(xì)菌培養(yǎng)：對(duì)痰標(biāo)本或肺泡灌洗液進(jìn)行定量細(xì)菌培養(yǎng)，計(jì)算每毫升中不同種類的細(xì)菌數(shù)（CFU/ml），并鑒定細(xì)菌。

②肺炎鏈球菌：肺炎鏈球菌在血平板上菌落為扁平、表面光滑、周圍有草綠色溶血環(huán)，有的菌落*塌陷，呈臍窩狀。該菌膽汁溶菌試驗(yàn)陽性、發(fā)酵菊糖、Optochin敏感試驗(yàn)陽性，小白鼠毒力試驗(yàn)陽性等。

③流感嗜血桿菌（Heamophilus influenzae）：將標(biāo)本接種在巧克力選擇瓊脂平板上，放置含5%~10%CO２環(huán)境培養(yǎng)。細(xì)菌與*一起培養(yǎng)時(shí)有“衛(wèi)星現(xiàn)象”（salite phenomenon）。菌體為多形性革蘭陰性小桿菌。根據(jù)生長(zhǎng)需要Ｘ、Ｖ因子、生化反應(yīng)鑒定細(xì)菌。 

④軍團(tuán)菌（Legionella）：標(biāo)本接種在活性炭酵母浸膏培養(yǎng)基上（BCYE）培養(yǎng)，只能在BCYE培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的革蘭陰性桿菌（不易著色），結(jié)合生化反應(yīng)和血清學(xué)分型鑒定細(xì)菌。

⑤結(jié)核分枝桿菌：痰液或支氣管肺泡灌洗液經(jīng)處理雜菌后接種培養(yǎng)。（與尿結(jié)核菌培養(yǎng)方法相同）。

⑥肺炎支原體（Mycoplasma pneumonia）：肺炎支原體對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求比較高，培養(yǎng)基中需加入小牛血清和新鮮酵母液等。將采集的*標(biāo)本、支氣管分泌物、鼻咽洗液、痰等標(biāo)本接種于液體和固體選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)１～２周，結(jié)合菌落生長(zhǎng)特性和生化反應(yīng)鑒定。因肺炎支原體培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)而且陽性率很低，臨床常采用血清學(xué)或分子生物學(xué)方法檢測(cè)。

⑦肺炎衣原體和呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒等不同病毒需選擇不同的敏感細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)。

4、臨床意義

⑴病毒感染：流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、鼻病毒和冠狀病毒等為呼吸道感染的常見病毒，免疫功能低下者如嬰幼兒、老年人、癌癥患者、器官移植病人等易發(fā)生感染。引起嚴(yán)重急性呼吸綜合征（SARS）的*在2003年的流行中，中青年感染者居多。不同種類病毒引起的臨床表現(xiàn)和造成的嚴(yán)重程度不同，如較重者患有急性和慢性支氣管炎、毛細(xì)支氣管炎和急性肺炎。甲型流感病毒易發(fā)生變異，新變異株除散發(fā)流感外，還引起爆發(fā)流行。近年，巨細(xì)胞病毒（CMV）引起的肺炎有增加趨勢(shì)。病毒性肺炎嚴(yán)重者發(fā)生死亡。 

⑵細(xì)菌感染：下呼吸道細(xì)菌感染是導(dǎo)致病人死亡的一個(gè)主要原因。臨床常見感染有急性和慢性氣管炎、支氣管炎、肺炎、肺膿腫、胸腔膿腫、肺結(jié)核病等。常見感染細(xì)菌有肺炎鏈球菌、*、卡他布蘭漢菌、銅綠假單胞菌、產(chǎn)ESBL大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌、沙雷菌、不動(dòng)桿菌、流感嗜血桿菌等。肺膿腫常常伴有厭氧菌感染，偶見奴卡菌或放線菌感染。嗜肺軍團(tuán)菌肺炎及其小型爆發(fā)，國(guó)內(nèi)有不少報(bào)道。近年，結(jié)核病有回升趨勢(shì)，而且結(jié)核分枝桿菌多重耐藥菌株也不斷增加，每天約有8000人死于結(jié)核病，世界衛(wèi)生組織已將結(jié)核病作為重點(diǎn)控制的傳染病之一。此外，非結(jié)核分枝桿菌感染有增多趨勢(shì)。白喉棒狀桿菌引起傳染病白喉（diphtheria），細(xì)菌在咽部粘膜上繁殖，形成白色偽膜，繼而發(fā)生在喉部或氣管內(nèi)，容易造成窒息死亡。目前，該病幾乎絕跡。

由于病人自然咳出的痰容易被口腔正常菌群污染，痰培養(yǎng)生長(zhǎng)的細(xì)菌，有時(shí)難以評(píng)價(jià)是否有臨床意義，通過對(duì)痰質(zhì)量的評(píng)定和定量細(xì)菌培養(yǎng)，尚有一定的參考價(jià)值。當(dāng)痰細(xì)菌計(jì)數(shù)≥106CFU/ml或經(jīng)纖維支*、人工氣道吸引采集的下呼吸道分泌物細(xì)菌計(jì)數(shù)≥105CFU/ml、支氣管肺泡灌洗液細(xì)菌計(jì)數(shù)≥104CFU/ml和防污染支氣管肺泡灌洗液（PBAL）細(xì)菌計(jì)數(shù)≥103CFU/ml時(shí)，具有臨床診斷意義。

⑶真菌感染：免疫功能低下者如白血病病人和其他長(zhǎng)期應(yīng)用抗菌素治療的重癥病人，容易引起真菌性肺炎。病原真菌常以白念珠菌為主，其他可見曲霉菌、毛霉菌、組織胞漿菌等。AIDS患者易發(fā)生卡氏肺孢子菌（pneumocystis carinii）感染。

⑷支原體感染：肺炎支原體是人類原發(fā)性非典型肺炎（primary atypical pneumoniae, PAP）的主要病原體之一，肺炎支原體主要經(jīng)飛沫傳播，可導(dǎo)致疾病的流行，兒童及青少年多見發(fā)病。 

⑸衣原體感染：肺炎衣原體（Chlamydia pneumonia）在人之間通過飛沫傳播，引起支氣管炎、肺炎等，兒童和青少年容易感染，感染率為10%左右。我國(guó)成人肺炎衣原體抗體陽性率高達(dá)50%左右。鸚鵡熱衣原體肺炎是由于人接觸鳥類而感染。新生兒沙眼衣原體肺炎多因其在分娩過程中感染所致。