金壇市精達(dá)儀器制造廠 作者
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分子酶工程學(xué)在分析生物技術(shù)領(lǐng)域有廣闊的技術(shù)發(fā)展空間。酶法分析是分析生物技術(shù)中的主要內(nèi)容之一,包括酶試劑盒、酶聯(lián)免疫(ELISA)、酶標(biāo)基因探針、酶?jìng)鞲衅鞯鹊?,已?jīng)在臨床診斷、生物工藝過(guò)程分析與監(jiān)控、環(huán)境監(jiān)測(cè)、檢疫、生命科學(xué)研究等方面逐漸取代傳統(tǒng)的化學(xué)分析法。
分析用酶之所以被青睞,歸功于酶分子高度特異性和高催化效率,使微觀生物學(xué)反應(yīng)過(guò)程得以放大。然而,天然酶蛋白分子并非無(wú)缺,它們或太“嬌嫩”,熱穩(wěn)定性差,容易受抑制,受蛋白酶水解而失活,或催化性能不理想,固定化回收活力低下等等,導(dǎo)致許多分析用酶還未能實(shí)際發(fā)揮作用。特別具有很多優(yōu)點(diǎn)的固定化酶分析法和各類酶?jìng)鞲衅?,并沒(méi)有獲得廣泛應(yīng)用。
如何能夠?qū)γ傅鞍讓?shí)施分子改造,使它們的性能得到改善,是具有挑戰(zhàn)性的課題。化學(xué)修飾法曾經(jīng)是主要的手段,但盲目性比較大,效果常常不理想。分子酶工程學(xué)是近年發(fā)展起來(lái)的新的學(xué)科領(lǐng)域,其基礎(chǔ)是結(jié)構(gòu)生物學(xué)和生物信息學(xué),尤其是利用蛋白質(zhì)超分子結(jié)構(gòu)知識(shí),采用基因工程和蛋白質(zhì)工程手段,對(duì)天然酶實(shí)施定向改造和體外分子進(jìn)化,在開(kāi)發(fā)新型、高質(zhì)量分析酶試劑方面意義重大。
近期在作者實(shí)驗(yàn)室的研究進(jìn)展,包括:(1)大腸桿菌堿性磷酸酶的定向改造與分子體外進(jìn)行;(2)固定化酶空間取向控制的“錨鏈”(anchor―chain)模型;(3)順序酶反應(yīng)融合蛋白分子系統(tǒng)的構(gòu)建;(4)免疫酶光開(kāi)關(guān);(5)增強(qiáng)電子傳遞速率的融合酶分子系統(tǒng)等等。這些研究成果不僅在生物傳感、蛋白質(zhì)芯片和酶標(biāo)等分析生物技術(shù)中有重要應(yīng)用價(jià)值,而且為發(fā)展其它的分析酶系統(tǒng)提供了一些新的技術(shù)思路和模式方法。
分子酶工程學(xué)的研究進(jìn)展得益于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)知識(shí)的增長(zhǎng)。如今,越來(lái)越多的酶的三維結(jié)構(gòu)被解析出來(lái),成為重塑蛋白質(zhì)分子的依據(jù)。然而,在現(xiàn)階段,我們還不具有“設(shè)計(jì)”蛋白質(zhì)的能力,這需要更加完備的結(jié)構(gòu)生物學(xué)知識(shí)。
相對(duì)于其它各種功能蛋白質(zhì),酶的結(jié)構(gòu)與功能研究還處于幼年期,在分析生物技術(shù)中的應(yīng)用更是較晚,但已經(jīng)展示出廣闊的發(fā)展前景。另外兩個(gè)值得關(guān)注的方向是抗體工程和抗體酶或催化抗體,它們?cè)诜治錾锛夹g(shù)中具有潛在的貢獻(xiàn)。/Product/ShowProduct.asp?ID=157
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