組織脂褐素含量熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

【資料簡(jiǎn)介】

 

 

組織脂褐素含量熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

 

主要用途

 

組織脂褐素含量熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)有機(jī)溶劑萃取可溶性脂褐素分子，直接由熒光分光光度儀分析，定量檢測(cè)組織樣品脂褐素含量的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種組織（動(dòng)物、人體等）裂解懸液的脂褐素含量檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)準(zhǔn)確。

 

技術(shù)背景

 

脂褐素（lipofusin），又稱為“磨損（wear and tear）”色素，是一種細(xì)胞內(nèi)與年齡相關(guān)的熒光胞漿顆粒色素，主要在有絲分裂后細(xì)胞的繼發(fā)性溶酶體內(nèi)。脂褐素常見(jiàn)于老年人的永恒性非分裂性組織細(xì)胞里，例如心臟、肝臟和神經(jīng)等，尤其在衰老誘導(dǎo)的細(xì)胞退變中聚集增多，特別是萎suo的組織。脂褐素來(lái)自于氧化的蛋白和脂質(zhì)，成為細(xì)胞衰老中后期的獨(dú)立指征。 基于有機(jī)溶劑可溶性脂褐素是丙二醛與游離氨基的物質(zhì)交聯(lián)而成的具有熒光的化合物，有機(jī)溶劑萃取后，直接通過(guò)熒光分光光度計(jì)（激發(fā)波長(zhǎng)350nm，散發(fā)波長(zhǎng)435nm）檢測(cè)，產(chǎn)生熒光峰值的變化，來(lái)測(cè)定脂褐素的總含量。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

 

清理液（Reagent A）     XX毫升

處理液（Reagent B）     XX毫升

稀釋液（Reagent C）     XX毫升

標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D）     XX毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份

 

保存方式

 

保存標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，處理液（Reagent B）、稀釋液（Reagent C）和標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D）具有腐蝕性和揮發(fā)性，密閉瓶蓋，嚴(yán)格注意操作安全；有效保證6月

 

用戶自備

 

Lv仿:用于樣品處理

1.5毫升離心管：用于標(biāo)準(zhǔn)液配制和樣品制備的容器

2毫升離心管：用于樣品操作的容器

15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器

DOUNCE勻漿器：用于裂解組織細(xì)胞

臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品操作

比色皿：用于比色分析的容器

分光光度儀：用于比色分析

 

實(shí)驗(yàn)步驟

 

一、樣品準(zhǔn)備

 

• 手術(shù)取出動(dòng)物組織，并秤重以確定500毫克組織重量 
• （選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管
• （選擇步驟）加入3毫升清理液（Reagent A）清洗1次
• 移入到一個(gè)液氮凍存管
• 即刻放進(jìn)液氮罐過(guò)夜
• 次日從液氮罐里取出，即刻（zui快速度）用研磨棒碾碎組織成粉末狀（注意：切莫使組織凍融）
• 放進(jìn)一個(gè)2毫升離心管
• 加入XX毫升處理液（Reagent B） 
• 轉(zhuǎn)移到DOUNCE勻漿器
• 用勻漿棒勻化組織（約40下）
• 轉(zhuǎn)移到15毫升錐形離心管
• 加入2毫升用戶自備的lv仿
• 渦旋震蕩10秒，充分混勻
• 放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為2000g
• 小心移取1毫升上層液相到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管 
• 置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作（注意：避免保存過(guò)夜）

 

二、標(biāo)準(zhǔn)樣品配制

 

• 準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號(hào)管
• 分別加入XX微升稀釋液（Reagent C）到1至5號(hào)管
• 移取XX微升標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D）到1號(hào)管，混勻
• 小心移取XX微升1號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D）到2號(hào)管，混勻
• 小心移取XX微升2號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D）到3號(hào)管，混勻
• 小心移取XX微升3號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D）到4號(hào)管，混勻
• 將1至5號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用；標(biāo)準(zhǔn)管濃度見(jiàn)下表

 

管號(hào)	稀釋液（Reagent C）	標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D）	測(cè)定體系 標(biāo)準(zhǔn)硫酸奎寧含量
1	XX微升	XX微升	XX微克
2	XX微升	XX微升1號(hào)管	XX微克
3	XX微升	XX微升2號(hào)管	XX微克
4	XX微升	XX微升3號(hào)管	XX微克
5	XX微升	0	0

 

• 標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定

 

• 加入XX微升稀釋液（Reagent C）到新的比色皿
• 加入XX微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D），混勻
• 即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測(cè)（激發(fā)波長(zhǎng)350nm，散發(fā)波長(zhǎng)435nm）：獲得熒光讀數(shù)
• 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至3四次
• 構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為熒光讀數(shù)；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)硫酸奎寧/等價(jià)脂褐素含量（微克）

 

• 樣品測(cè)定

 

• 加入1毫升上述制備的樣品到新的比色皿
• 即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測(cè)（激發(fā)波長(zhǎng)350nm，散發(fā)波長(zhǎng)435nm）：獲得樣品熒光讀數(shù)
• 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)脂褐素含量（微克）

 

• 含量計(jì)算

 

XX

 

注意事項(xiàng)

 

• 本產(chǎn)品為25次操作，包括標(biāo)準(zhǔn)樣品
• 操作時(shí)，須戴手套
• 系統(tǒng)操作時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)定只需1次
• 處理液（Reagent B）、稀釋液（Reagent C）和標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D）具有腐蝕性和揮發(fā)性，密閉瓶蓋，嚴(yán)格注意操作安全
• 孵育時(shí)，避免光照
• 通常脂褐素含量表述為：微克/毫克蛋白；微克/毫升；微克/組織重量
• 本公司提供系列脂褐素檢測(cè)試劑產(chǎn)品

 

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

 

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感

 

使用承諾

 

秉著“信譽(yù)*、客戶滿意、質(zhì)量承諾”的宗旨為我們的用戶提供產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后，應(yīng)按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定，保證說(shuō)明書(shū)所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問(wèn)題，請(qǐng)立即以書(shū)面形式（實(shí)驗(yàn)報(bào)告）與本公司，并將該產(chǎn)品退回，經(jīng)檢驗(yàn)確系產(chǎn)品質(zhì)量所致，本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯(cuò)誤操作所致，本公司不承擔(dān)由此造成的損失。

 

友情提醒

 

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

 

 

訂購(gòu)信息

 

單組分訂購(gòu)信息

 

編號(hào) 名稱 規(guī)格

JW50365.2 組織脂褐素含量熒光定量檢測(cè)試劑盒 20次

JW50365.2A 清理液（Reagent A） 100毫升

JW50365.2B  處理液（Reagent B） 50毫升

JW50365.2C  稀釋液（Reagent C） 50毫升

JW50365.2D  標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D） 5毫升

 

試劑盒訂購(gòu)信息

 

產(chǎn)品編號(hào)	名稱	規(guī)格
JW80056.1	細(xì)胞衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒 （適合與紅細(xì)胞分別；不適合人體心肌和小鼠腦組織）	50次
JW80056.2	全組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒	10次
JW80056.3	冰凍切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒	50次
JW80056.4.1	特殊石蠟切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位間接染色試劑盒	10次
JW80056.4.2	特殊石蠟切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位直接染色試劑盒	50次
JW80064.1	細(xì)胞衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒（與紅細(xì)胞無(wú)法分別）	50次
JW80064.2	全組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒	10次
JW80064.3	冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒	50次
JW80064.4.1	特殊石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位間接染色試劑盒	10次
JW80064.4.2	特殊石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位直接染色試劑盒	50次
JW80065.1	細(xì)胞衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒（與紅細(xì)胞無(wú)法分別）	50次
JW80065.2	全組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒	10次
JW80065.3	冰凍切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒	50次
JW80065.4.1	特殊石蠟切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位間接染色試劑盒	10次
JW80065.4.2	特殊石蠟切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位直接染色試劑盒	50次
JW80066.1	細(xì)胞衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅 （ZIEHL-NEELSEN）原位染色試劑盒	50次
JW80066.2	全組織衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅（ZIEHL-NEELSEN）原位染色試劑盒	10次
JW80066.3	冰凍切片組織衰老晚期特異性脂褐素堿性品紅（ZIEHL-NEELSEN）染色試劑盒	50次
JW80066.4.1	特殊石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅 （ZIEHL-NEELSEN）原位間接染色試劑盒	10次
JW80066.4.2	特殊石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅 （ZIEHL-NEELSEN）原位直接染色試劑盒	50次
JW80069.1	細(xì)胞衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒（與紅細(xì)胞無(wú)法分別）	50次
JW80069.2	全組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒	10次
JW80069.3	冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒	50次
JW80069.4.1	特殊石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位間接染色試劑盒	10次
JW80069.4.2	特殊石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位直接染色試劑盒	50次
JW80070.1	細(xì)胞衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法（SCHMORL）染色試劑盒	50次
JW80070.2	全組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法（SCHMORL）染色試劑盒	10次
JW80070.3	冰凍切片組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法（SCHMORL）染色試劑盒	50次
JW80070.4.1	特殊石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法（SCHMORL）間接染色試劑盒	10次
JW80070.4.2	特殊石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法（SCHMORL）直接染色試劑盒	50次
JW80071.1	細(xì)胞衰老特異性晚期脂褐素高碘酸希爾（PAS）法 品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）原位染色試劑盒	50次
JW80071.2	全組織衰老特異性晚期脂褐素高碘酸希爾（PAS）法 品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）原位染色試劑盒	10次
JW80071.3	冰凍切片組織衰老晚期特異性脂褐素高碘酸希爾（PAS）法 品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）原位染色試劑盒	50次
JW80071.4.1	特殊石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素高碘酸希爾（PAS）法 品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）原位間接染色試劑盒	10次
JW80071.4.2	特殊石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素高碘酸希爾（PAS）法 品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）原位直接染色試劑盒	50次
JW50648.1	細(xì)胞脂褐素含量熒光定量檢測(cè)試劑盒	50次
JW50648.2	組織脂褐素含量熒光定量檢測(cè)試劑盒	50次