多重引物PCR擴(kuò)增

【資料簡(jiǎn)介】

微衛(wèi)星（microsalite analysis）即短串聯(lián)重復(fù)序列(Short tandem repeat，STR)，它是由2-6bp重復(fù)單位構(gòu)成的DNA序列，通常擴(kuò)增獲得的多態(tài)性長(zhǎng)度片段范圍在100-400bp之間。STR基因座廣泛地存在于哺乳動(dòng)物基因組中，以人類基因組為例，平均每15-20kb就存在1個(gè)STR座位，據(jù)此估計(jì)整個(gè)人類基因組中大約有50,000-100,000個(gè)STR位點(diǎn)。由于STR位點(diǎn)具有高度的多態(tài)性和穩(wěn)定的遺傳性，因此較適合于作為遺傳學(xué)DNA分子標(biāo)記，目前STR分析已廣泛應(yīng)用于遺傳制圖、性狀連鎖性分析、親子鑒定、疾病基因定位和物種多態(tài)性研究等諸多領(lǐng)域。
多重引物PCR擴(kuò)增
1985年，Mullis發(fā)明了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction, PCR）, 使DNA的體外復(fù)制變成了現(xiàn)實(shí)。1988年，Saiki 等將耐熱DNA聚合酶引入PCR，提高了擴(kuò)增反應(yīng)的特異性和效率，簡(jiǎn)化了操作程序，并實(shí)現(xiàn)了DNA擴(kuò)增的自動(dòng)化，迅速的推動(dòng)了PCR技術(shù)的應(yīng)用和普及。PCR能夠在體外快速、特異性的擴(kuò)增靶DNA，已成為當(dāng)今zui重要的分子生物學(xué)技術(shù)之一。法醫(yī)物證應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增人類基因組DNA中高度多態(tài)性位點(diǎn)，擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)過(guò)片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析或序列多態(tài)性分析研究不同個(gè)體間DNA分子水平上的差異及其遺傳規(guī)律，在個(gè)人識(shí)別、親子鑒定中發(fā)揮了重要作用。 多重引物PCR擴(kuò)增
但如何實(shí)現(xiàn)在一個(gè)反應(yīng)管中多個(gè)STR位點(diǎn)同時(shí)均一穩(wěn)定的擴(kuò)增，卻一直是科研界的一個(gè)難題。中德生物經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的研究，通過(guò)對(duì)目標(biāo)靶基因區(qū)域的選擇，引物設(shè)計(jì)的優(yōu)化，電子PCR，多重侯選引物的軟件分析，反應(yīng)參數(shù)的優(yōu)化等方法，zui終建立了穩(wěn)定的多重STR-pcr擴(kuò)增技術(shù)平臺(tái)，并在此技術(shù)平臺(tái)基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)了“STR銀染基因分型擴(kuò)增試劑盒”，“STR熒光基因分型擴(kuò)增試劑盒”“寵物犬STR銀染基因分型擴(kuò)增試劑盒”產(chǎn)品。同時(shí)在此技術(shù)平臺(tái)基礎(chǔ)上正在開(kāi)發(fā)食品安全領(lǐng)域的相關(guān)檢測(cè)試劑盒，如飼料中牛、羊、豬肉組織成分檢測(cè)系統(tǒng)。