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多重引物PCR擴增
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關(guān) 鍵 詞 | 多重引物PCR擴增 |
- 【資料簡介】
微衛(wèi)星(microsalite analysis)即短串聯(lián)重復序列(Short tandem repeat,STR),它是由2-6bp重復單位構(gòu)成的DNA序列,通常擴增獲得的多態(tài)性長度片段范圍在100-400bp之間。STR基因座廣泛地存在于哺乳動物基因組中,以人類基因組為例,平均每15-20kb就存在1個STR座位,據(jù)此估計整個人類基因組中大約有50,000-100,000個STR位點。由于STR位點具有高度的多態(tài)性和穩(wěn)定的遺傳性,因此較適合于作為遺傳學DNA分子標記,目前STR分析已廣泛應用于遺傳制圖、性狀連鎖性分析、親子鑒定、疾病基因定位和物種多態(tài)性研究等諸多領(lǐng)域。
多重引物PCR擴增
1985年,Mullis發(fā)明了聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR), 使DNA的體外復制變成了現(xiàn)實。1988年,Saiki 等將耐熱DNA聚合酶引入PCR,提高了擴增反應的特異性和效率,簡化了操作程序,并實現(xiàn)了DNA擴增的自動化,迅速的推動了PCR技術(shù)的應用和普及。PCR能夠在體外快速、特異性的擴增靶DNA,已成為當今zui重要的分子生物學技術(shù)之一。法醫(yī)物證應用PCR技術(shù)擴增人類基因組DNA中高度多態(tài)性位點,擴增產(chǎn)物經(jīng)過片段長度多態(tài)性分析或序列多態(tài)性分析研究不同個體間DNA分子水平上的差異及其遺傳規(guī)律,在個人識別、親子鑒定中發(fā)揮了重要作用。 多重引物PCR擴增
但如何實現(xiàn)在一個反應管中多個STR位點同時均一穩(wěn)定的擴增,卻一直是科研界的一個難題。中德生物經(jīng)過長時間的研究,通過對目標靶基因區(qū)域的選擇,引物設(shè)計的優(yōu)化,電子PCR,多重侯選引物的軟件分析,反應參數(shù)的優(yōu)化等方法,zui終建立了穩(wěn)定的多重STR-pcr擴增技術(shù)平臺,并在此技術(shù)平臺基礎(chǔ)上開發(fā)了“STR銀染基因分型擴增試劑盒”,“STR熒光基因分型擴增試劑盒”“寵物犬STR銀染基因分型擴增試劑盒”產(chǎn)品。同時在此技術(shù)平臺基礎(chǔ)上正在開發(fā)食品安全領(lǐng)域的相關(guān)檢測試劑盒,如飼料中牛、羊、豬肉組織成分檢測系統(tǒng)。
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