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小鼠軟骨相關(guān)蛋白(CRTAP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理

2017年09月19日 14:07:54人氣:190來源:上海一研生物科技有限公司

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關(guān) 鍵 詞小鼠軟骨相關(guān)蛋白,CRTAP,試劑盒
【資料簡介】

小鼠軟骨相關(guān)蛋白(CRTAP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒檢測范圍:96T 10pg/ml-240pg/ml

使用目的:
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中軟骨相關(guān)蛋白(CRTAP)含量。

實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠軟骨相關(guān)蛋白( CRTAP)水平。用純化的
小鼠軟骨相關(guān)蛋白(CRTAP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次
加入軟骨相關(guān)蛋白(CRTAP),再與  HRP 標(biāo)記的軟骨相關(guān)蛋白(CRTAP)抗體結(jié)合,形成
抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP  酶的催化下
轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的軟骨相關(guān)蛋白
(CRTAP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算
樣品中小鼠軟骨相關(guān)蛋白(CRTAP)濃度。

小鼠軟骨相關(guān)蛋白(CRTAP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結(jié):

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo), OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的
OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與  OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本  OD值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.小鼠軟骨相關(guān)蛋白(CRTAP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒有效期:6個月

上海一研生物科技有限公司作者

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