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植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)elisa試劑盒技術參數(shù)
資料類型 | docx文件 | 資料大小 | 13682 |
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關 鍵 詞 | 植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)elisa試劑盒,植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)elisa試劑盒 |
- 【資料簡介】
植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)elisa試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用
實驗原理
植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)ELISA試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣本處理要求
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)ELISA試劑盒組成注意事項1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產品。
10. 實驗還需要酶標儀(450nm),37℃恒溫箱,高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL以及蒸餾水或去離子水。
11. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。
12. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
13. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
14.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能人上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
15.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
產品優(yōu)勢1. 品種齊全、質量可靠、靈敏度高、特異性強、重復性好、操作簡便、穩(wěn)定性好。
2. 同城(上海)需要代測可免費上門取樣,享免費送貨。
3. 訂購ELISA試劑盒可提供免費代測服務。
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