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羅斯肉瘤病毒PCR檢測試劑盒實驗原理
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關(guān) 鍵 詞 | 羅斯肉瘤病毒PCR檢測試劑盒,羅斯肉瘤病毒PCR檢測試劑盒羅斯肉瘤病毒PCR檢測試劑盒,羅斯肉瘤病毒 |
- 【資料簡介】
羅斯肉瘤病毒PCR檢測試劑盒說明書
本產(chǎn)品是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實驗。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品5 μL 與用戶自備的模板,引物和水共5 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反應(yīng)(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取0 μL 電泳檢查擴增結(jié)果。
羅斯肉瘤病毒PCR檢測試劑盒技術(shù)特點:
、準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對照試驗>000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對,結(jié)果一致性大于99%。
2、高靈敏:可檢測低至0ng的人基因組DNA。
3、快速:整個檢測流程只需3小時。
4、簡便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5、防污染
6、高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補鏈結(jié)合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,在延伸中產(chǎn)生熒光。
組成及試劑配制:
、 酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前5分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約0分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,00 U/L,50 U/L,25 U/L,2.5 U/L,6.25 U/L,3.2 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制00 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:×20ml。
4、 檢測稀釋液A:×0ml。
5、 檢測稀釋液B:×0ml。
要自備的器材:
.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 專用反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(0 µL、200 µL、000 µL)、滅菌雙蒸水。
羅斯肉瘤病毒PCR檢測試劑盒具有下列特點:
.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 份
操作方法:
產(chǎn)品名稱直接測定
2測定準(zhǔn)備
3背景對照測定
4樣品活性測定
5計算樣品活性
備注:
.本產(chǎn)品為50次操作
2.操作時,須戴手套
3.操作時,避免污染母液
4.即刻進(jìn)行熒光檢測分析
5.本產(chǎn)品染色劑不易洗掉,染色持久
6.本公司提供系列試劑產(chǎn)品
注意事項:.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
運輸及保存:低溫運輸、-20℃保存,有效期一年。
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