大鼠肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）ELISA試劑盒產(chǎn)品

【資料簡介】

大鼠肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）ELISA試劑盒產(chǎn)品

實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）水平。用純化的大鼠肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ），再與HRP標(biāo)記的肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）濃度。

試劑盒組成

1	30倍濃縮洗滌液	20ml×1瓶	7	終止液	6ml×1瓶
2	酶標(biāo)試劑	6ml×1瓶	8	標(biāo)準(zhǔn)品（80μg/L）	0.5ml×1瓶
3	酶標(biāo)包被板	12孔×8條	9	標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1瓶	10	說明書	1份
5	顯色劑A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2張
6	顯色劑B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1個

標(biāo)本要求

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

3．組織處理：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

大鼠肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）ELISA試劑盒產(chǎn)品

操作步驟

1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

40μg/L	5號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
20μg/L	4號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10μg/L	3號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5μg/L	2號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5μg/L	1號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.         加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

4.         配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7.         溫育：操作同3。

8.         洗滌：操作同5。

9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.     測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

大鼠肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）ELISA試劑盒產(chǎn)品相關(guān)產(chǎn)品：

Anti-HCV-NS1/FITC  熒光素標(biāo)記丙型肝炎病毒-NS1抗體IgG
Anti-HCV-NS3/FITC  熒光素標(biāo)記丙型肝炎病毒-NS3抗體IgG
Anti-HCV-NS4a/FITC  熒光素標(biāo)記丙型肝炎病毒-NS4a抗體IgG
Anti-HDAC1/HD1/FITC  熒光素標(biāo)記組蛋白去乙?；?抗體IgG
Anti-HDAC2/HD2/FITC   熒光素標(biāo)記組蛋白去乙?；?抗體IgG
Anti-HDAC3/HD3/FITC   熒光素標(biāo)記組蛋白去乙?；?抗體IgG
Anti-Scavenging Receptor SR-BI/FITC  熒光素標(biāo)記高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體IgG
Anti-Heamachrome/FITC  熒光素標(biāo)記血紅素抗體IgG
Anti-HER2 receptor（NT）/FITC  熒光素標(biāo)記抗c-erbB-2受體抗體（N端）IgG
Anti-HER2 receptor（NT）/FITC  熒光素標(biāo)記抗c-erbB-2受體抗體（N端）IgG
Anti-HER2 receptor/FITC  熒光素標(biāo)記抗HER2受體抗體IgG
Anti-HER2 receptor/FITC  熒光素標(biāo)記抗c-erbB-2受體抗體IgG
Anti-HERG/FITC   熒光素標(biāo)記特異性鉀離子通道蛋白抗體IgG
Anti-HEV/FITC  熒光素標(biāo)記戊型肝炎病毒抗體IgG
Anti-Melamine/Gold  金標(biāo)記抗三聚氰胺抗體IgG（10及15nm）
Anti-HGF/FITC  熒光素標(biāo)記肝細(xì)胞生長因子抗體IgG
Anti-HGV/FITC  熒光素標(biāo)記庚型肝炎病毒抗體IgG
Anti-hHb/FITC  熒光素標(biāo)記小鼠抗人血紅蛋白單克隆抗體IgG
Anti-HHV4/EBV/FITC  熒光素標(biāo)記人類皰疹病毒4抗體IgG