人醛固酮ELISA檢測試劑盒說明書

【資料簡介】

試驗原理：
ELISA檢測試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知ALD濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將ALD和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中ALD的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料
1． 蒸餾水。
2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3． 振蕩器及磁力攪拌器等。
 
安全性
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
 
操作注意事項
1． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
2． 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，ELISA檢測試劑盒密封保存，以免變質(zhì)。
3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6． 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8． 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9． 按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
 
樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
 
試劑的準(zhǔn)備
1． 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：

2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
 
 
操作步驟
1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3． 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8． 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限
6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。
 
試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
 
結(jié)果 判 斷 與分析
1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
 
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），ELISA檢測試劑盒相應(yīng)的ALD標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的ALD含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
 
3、檢測值范圍：0-800pg/ml
 
4、敏感度： 1.0 pg/ml

Y142227 橄欖苦苷 Oleuropein 橄欖苦甙 20mg/支 32619-42-4
Y142228 黨參炔苷 Lobetyolin 黨參炔甙 10mg/支 136085-37-5
Y142229 咪達(dá)唑侖雜質(zhì) 有關(guān)物質(zhì) 20mg 171270-201001
Y142230 N-脫烷基西泮 有關(guān)物質(zhì) 20mg 171270-201001
Y142231 氯氮卓雜質(zhì)Ⅰ 有關(guān)物質(zhì) 50mg/支 171268-201001
Y142232 2-氨基-5-氯二苯酮 有關(guān)物質(zhì) 50mg/支 171268-201001
Y142233 硝西泮雜質(zhì) 有關(guān)物質(zhì) 50mg/支 171267-201001
Y142234 2-氨基-5-硝基二苯酮 有關(guān)物質(zhì) 50mg/支 171267-201001
Y142235 鹽酸嗎啡 鑒別 自取 100mg 171256-200401
Y142236 勞拉西泮雜質(zhì)B 檢查 100mg 171254-200401
Y142237 2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮 檢查 100mg 171254-200401
Y142238 鹽酸納曲酮 含量測定 20mg 171249-200802
Y142239 鹽酸洛非西定 含量測定 20mg 171246-200301
Y142240 鹽酸丁丙諾啡 含量測定 自取 20mg 171244-200704
Y142241 苯甲酰愛康寧 含量測定 20mg 171233-200606
Y142242 鹽酸甲基愛康寧 20mg
Y142243 2-氨基-2’-氯-5-硝基二苯酮 檢查 100mg 171228-200602
Y142244 氯硝西泮 含量測定 自取 100mg 171227-200302
Y142245 那可丁 含量測定 100mg 171224-200403
Y142246 乙酰可待因 含量測定 20mg 171209-200507
Y142247 O3-單乙酰嗎啡氨基磺酸鹽 含量測定 20mg 171208-200609
Y142248 06-單乙酰嗎啡鹽酸鹽 20mg
Y142249 細(xì)菌內(nèi)毒素（精品） 可用于建立動物發(fā)熱模型 -20℃，避光 1mg/支 150602-200502
Y142250 細(xì)菌內(nèi)毒素（工作品） 檢查 -20℃，避光 10支/盒 150601-201072
Y142251 細(xì)菌內(nèi)毒素 檢查 -20℃，避光 10000EU/支 150600-200707
Y142252 抗甲狀腺過氧化物酶抗體 免疫測定用 -20℃，避光 430IU/支 150557-200601
Y142253 抗甲狀腺球蛋白抗體 免疫測定用 -20℃，避光 4000IU/支 150556-200601
Y142254 人絨毛膜促性腺激素 免疫測定用 -20℃，避光 22.8IU/支 150555-9003
Y142255 胰高血糖素 免疫測定用 -20℃，避光 19ng/支 150554-9604
Y142256 人胰島素C-肽 免疫測定用 -20℃，避光 21ng/支 150553-9911
Y142257 反三碘甲腺原氨酸 免疫測定用 -20℃，避光 23ng/支 150552-0004
Y142258 甲狀腺素 免疫測定用 -20℃，避光 1000ng/支 150551-0004
Y142259 三碘甲腺原氨酸 免疫測定用 -20℃，避光 50ng/支 150550-0004
Y142260 游離前列腺特異抗原 免疫測定用 -20℃，避光 0.5ml/支 150544-200702
Y142261 前列腺特異抗原 免疫測定用 -20℃，避光 150ng/支 150543-0004
Y142262 甲胎蛋白 免疫測定用 -20℃，避光 800ng/661IU/支 150542-0004
Y142263 癌胚抗原 免疫測定用 -20℃，避光 320ng/支 150541-0210
Y142264 鐵蛋白 免疫測定用 -20℃，避光 2ug/支 540-9410
Y142265 人胎盤泌乳素（HPL） 免疫測定用 -20℃，避光 14.2μg/支 150536-9903
Y142266 人絨毛膜促性腺激素β亞單位 免疫測定用 -20℃，避光 240ng/0.5ml/支 150535-201002
Y142267 生長激素 免疫測定用 -20℃，避光 1.22mIU/0.61ug/支 534-9604
Y142268 促卵泡生成素 免疫測定用 -20℃，避光 450mIU/支 150533-0212
Y142269 泌乳素 免疫測定用 -20℃，避光 9mIU/支 150532-0004
Y142270 促黃體生成激素（LH） 免疫測定用 -20℃，避光 930mIU 150531-201003
Y142271 促甲狀腺素（TSH） 免疫測定用 -20℃，避光 600μIU 150530-0312
Y142272 縮宮素（合成） 效價測定 -20℃，避光 21IU/支 050529-200902
Y142273 人絕經(jīng)尿促性素（HMG） 效價測定 -20℃，避光 FSH190IU、LH242IU/支 150524-200503
Y142274 豬胰島素原 試劑盒測試 -20℃，避光 2.2μg/支 523-8901
Y142275 毒毛旋花子苷G 效價測定 2-8℃，避光 20mg/支 150514-870405
Y142276 絨促性素 效價測定 -20℃，避光 60IU/支 150513-200409
Y142277 磷酸組胺 檢查用 2-8℃，避光 25mg/支 150510-200412
Y142278 葡萄糖酸銻鈉 效價測定 2-8℃，避光 約2.5g 150506-8906
Y142279 豬胰島素（高純〕 效價測定 -20℃，避光 20mg/支 150505-9609
Y142280 胰島素（豬） 效價測定 -20℃，避光 20mg/支 504-8708
Y142281 垂體后葉 效價測定 2-8℃，避光 約30mg 502-8709
Y142282 洋地黃 效價測定 2-8℃，避光 約2.5g 501-8004
Y142283 游離三碘甲狀腺原氨酸 552/362fmol 150002-
Y142284 游離甲狀腺素 553/380fmol 150001-
Y142285 脫蘇氨醇8奧曲肽 供醋酸奧曲肽 密封，4℃保存 2mg 140795-201001
Y142286 N-乙酰-半胱氨酸1-鮭降鈣素 供鮭降鈣素 密封，4℃保存 2mg 140793-201001
Y142287 前列腺素B1 供前列地爾 -20℃，避光 見標(biāo)示量 140791-200801
Y142288 前列腺素A1 供前列地爾 -20℃，避光 見標(biāo)示量 140790-200801
Y142289 肝素鈉 供鑒別與有關(guān)物質(zhì)系統(tǒng)適用性 常溫，避光 100mg 140787-201001
Y142290 烏司他丁 供2010版 -20℃，避光 1000u 140785-201001
Y142291 β-丙氨酸 檢查用 常溫，避光 20mg 140783-200801
Y142292 鹽酸阿糖胞苷 供鹽酸阿糖胞苷 常溫，避光 50mg 140784-201001
Y142293 醋酸精氨酸 供氨基酸鑒別 常溫，避光 50mg 140781-200801
Y142294 聚普瑞鋅 供聚普瑞鋅 2-8℃，密封 20mg 140772-201001