RAW264.7細(xì)胞株的傳代

【資料簡(jiǎn)介】

1) 將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊的培養(yǎng)液棄掉， 然后用D-Hanks液洗兩次，(一定要洗干凈，以免影響的消化作用)

2) 加入0.25%-EDTA消化，25cm培養(yǎng)瓶加0.4ml， 37度消化5min，鏡下看到細(xì)胞變圓，間隙增大。

3)立即加含10%FCS的培養(yǎng)液終止消化，用細(xì)胞刮刀輕刮，注意，這時(shí)候用吸管吹不下來(lái)，但是刮刀卻很容易刮下來(lái)，而且對(duì)細(xì)胞的損傷極小

4)離心，棄上清，加新的培養(yǎng)液(10%FCS)，小心吹勻，分裝入新的培養(yǎng)瓶

此法屢試不爽，細(xì)胞生長(zhǎng)飽滿圓潤(rùn)，再也沒(méi)出現(xiàn)過(guò)以前那種情況。