糖代謝系列_β木糖苷酶測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意 :正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細(xì)菌和真菌等生物體,是催化木聚糖類半纖維素降解的關(guān)鍵酶,產(chǎn)物木糖可作為碳源應(yīng)用于微生物發(fā)酵。另外,β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應(yīng)用于造紙工業(yè),比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保,具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。
糖代謝系列_β木糖苷酶測(cè)試盒
測(cè)定原理:
β-木糖苷酶催化對(duì)硝基苯-酚-β-D-木糖苷產(chǎn)生對(duì)硝基苯-酚,對(duì)硝基苯-酚在405nm處有特征吸收峰,測(cè)定405nm光吸收增加速率,可計(jì)算β-木糖苷酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體1mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體10mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體10mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1.組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃,離心20min,取上清待測(cè)。
2.細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
3.液體:直接檢測(cè)。