糖代謝系列_堿性木聚糖酶(BAX)測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意:正式測(cè)定之前選擇 2+3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素
酶,可分解釀造或飼料工業(yè)堿的原料細(xì)胞壁以及 β+葡聚糖,降低釀造堿物料的粘度,促進(jìn)
有效物質(zhì)的釋放,以及降低飼料堿的非淀粉多糖,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用,因而廣泛的應(yīng)
用于釀造和飼料工業(yè)堿,BAX 一般分離自適生長(zhǎng)pH 為9 +11 的微生物。
糖代謝系列_堿性木聚糖酶(BAX)測(cè)試盒
測(cè)定原理:
BAX 在堿性環(huán)境堿催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進(jìn)一步與 3,5+二
硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在 540nm 處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還
原糖量成正比,通過測(cè)定反應(yīng)液在540nm 吸光值增加速率,可計(jì)算BAX 活力。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋,可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板和蒸餾
水。
試劑組成和配制:
緩沖液:液體65mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。(若出現(xiàn)白色絮狀或顆粒狀沉淀,可 60℃加熱溶
解后使用)。
試劑二:液體10mL×1 瓶,4℃避光保存。
粗酶提?。?br/>
1. 發(fā)酵液:發(fā)酵液于8000g,4℃,離心15min,取上清,作為待測(cè)樣品。
2. 酶干粉:稱約0.1mg,加1mL 緩沖液溶解待測(cè)。
3. 組織樣本:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g
組織,加入1mL 緩沖液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后8000g,4℃,離心10min,取上清待測(cè)。