苯丙-氨酸解氨酶PAL測試盒_花青素合成系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
苯丙-氨酸解氨酶PAL測試盒_花青素合成系列
測定意義:
PAL(EC4. 3 1 5)廣泛存在于各種植物和少數(shù)微生物中,是植物體內(nèi)苯丙烷類代謝的關(guān)鍵酶,與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關(guān),在植物正常生長發(fā)育和抵御病菌侵害過程中起重要作用。
測定原理:
PAL 催化 L-苯丙-氨酸裂解為反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在 290nm 處有大吸收值,通過測定吸光值升高速率計(jì)算 PAL 活性。
所需的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 40mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×3 瓶,4℃保存。臨用前每瓶加入 4mL 蒸餾水水充分溶解待用;用不完的試劑 4℃保存;
試劑三:液體 2.5mL×1 瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。