BCA蛋白法含量測試盒_蛋白-含量系列
測定方法:分光光度法
產品規(guī)格:50管/48樣
注 意 : 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
樣品可溶性蛋白質含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質含量也用于食品等質量分析。
BCA蛋白法含量測試盒_蛋白-含量系列
測定原理:
堿性條件下,蛋白質中半胱-氨酸、胱-氨酸、色-氨酸、酪-氨酸以及肽鍵,能將Cu2+還原成Cu+;2分子的BCA與Cu+結合,生成紫色絡合物,在540-595nm有吸收峰,562nm處吸收峰-強。
自備儀器和用品:
臺式離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計、移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑A:液體60mL×1瓶,4℃保存。
試劑B:液體1.2mL×1支,4℃保存。
標準蛋白:液體2 mL×1支,4℃保存。
工作液配制:
臨用前請根據(jù)擬用工作液體積(樣本數(shù)×1 mL),將試劑A和B按照50:1的比例混合,蓋緊后充分混勻。
樣品中可溶性蛋白質提?。?br/>
1.液體樣品:澄清無色液體樣品可以直接測定。
2.組織樣品:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液(自備,根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水)
冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即待測液。
3. 細菌、細胞:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。