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貨號	EY-XY3211	組織來源	椎間盤組織
產(chǎn)品規(guī)格	5×105	用途	僅供科研研究實驗

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用
產(chǎn)品名稱：人椎間盤髓核細胞

英文名稱：Human Intervertebral Disc Nucleus Pulposu Cells

英文簡稱：NPCs

組織來源：椎間盤組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

人椎間盤髓核細胞

分離椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質(zhì)；周圍部的纖維環(huán)，由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時體積大而松散，位于椎間盤的中央，至成年時位置移至椎間盤的中后部；在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

人椎間盤髓核細胞

實驗室分離的人椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的人椎間盤髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

人椎間盤髓核細胞

培養(yǎng)基含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每3-4天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

人椎間盤髓核細胞

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

人椎間盤髓核細胞

① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
人椎間盤髓核細胞

人椎間盤髓核細胞

人胎盤微血管內(nèi)皮細胞	炭疽毒素受體2抗體
人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細胞	乙?；嚢彼?乙?；嚢彼峥贵w
人臍動脈內(nèi)皮細胞	銜接蛋白β抗體
人臍靜脈平滑肌細胞（原代細胞）	Acinus抗體
人臍動脈平滑肌細胞（原代細胞）	細胞周期后期促進蛋白亞基11抗體
人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞	非典型趨化因子受體3抗體
人視網(wǎng)膜muller細胞	腺瘤性結(jié)腸息肉病蛋白2抗體
人肺微血管內(nèi)皮細胞	ACN9蛋白抗體
人Ⅱ型肺泡上皮細胞	細胞分裂周期蛋白5抗體
人氣管上皮細胞	卵巢、胎盤、前列腺、睪丸蛋白22抗體
人氣管平滑肌細胞	細胞分裂周期蛋白16抗體
人支氣管上皮細胞（原代細胞）	肌動蛋白α3抗體
人支氣管平滑肌細胞	三號染色體開放閱讀框抗體
人心肌成纖維細胞	促腎上腺皮質(zhì)激素受體
人肺成纖維細胞	雄激素誘導(dǎo)增殖抑制蛋白抗體
人肝癌細胞	肌動蛋白調(diào)節(jié)蛋白CAPG抗體
人心肌細胞	?；拾贝济擋Ｃ?抗體
人冠狀動脈內(nèi)皮細胞	肌動蛋白樣蛋白9抗體
人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細胞	酸敏感離子通道蛋白3抗體
人原代 Naive T cell細胞	肌動蛋白相關(guān)蛋白1抗體
人乳腺導(dǎo)管上皮細胞	星形肌動蛋白抗體
人腎小管上皮細胞	激活素受體1B抗體
人腎小球系膜細胞	人椎間盤髓核細胞血管緊張素激活蛋白1抗體
人腎小球內(nèi)皮細胞	丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體
人腎足細胞	吸引素抗體
人輸尿管上皮細胞	甘油酯激酶線粒體抗體
人輸尿管平滑肌細胞	共濟失調(diào)7樣蛋白3B抗體
人膀胱上皮細胞	去整合素樣金屬蛋白酶13抗體
人膀胱平滑肌細胞	細胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑)
人膀胱成纖維細胞	Fyn結(jié)合蛋白抗體

人椎間盤髓核細胞

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。