(LQS）腐生菌細菌測試瓶 TGB/ 型號:ZW11-TGB庫號：M269761(LQS）腐生菌細菌測試瓶 TGB/ 型號:ZW11-TGB庫號：M269761(LQS）腐生菌細菌測試瓶 TGB/ 型號:ZW11-TGB庫號：M269761

腐生菌測試瓶/腐生菌細菌測試瓶 TGB/ 型號:ZW11-TGB

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一、產(chǎn)品品種：
細菌總數(shù)測試瓶（BT）
大菌測試瓶（FCB）
腐生菌測試瓶（TGB）
鐵細菌測試瓶（FEB）
硫酸鹽還原菌測試瓶（SRB）
二、方法原理：
采用絕跡稀釋法，即用無菌器將待測定的水樣逐級注入到測試瓶中，進行接種稀釋后，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)，據(jù)測試瓶陽性反應(yīng)和稀釋的倍數(shù)，計算出水樣中細菌量總數(shù)。
三、操作步驟：
① 將同一品種測試瓶排成一組，依次編上序號（按照估計的細菌量確定測試瓶個數(shù)，建議參考數(shù)值為：X×100的細菌量用３個測試瓶、X×101的細菌量用４個測試瓶、X×102的細菌量用５個測試瓶、X×103的細菌量用６個測試瓶）。
　　　　做二個平行樣重復(fù)試驗時應(yīng)排為二組；做三個平行樣重復(fù)試驗時應(yīng)排為三組。
② 用無菌器取1ml代表性水樣（采樣方法依據(jù)GB/T12997-1991、GB/T12998-1991、GB/T12999-1991、GB/T14581-1993的規(guī)定進行）注入1號瓶內(nèi)稀釋，充分振搖，待用（平行樣亦按此操作，下同）；

1
③ 用另一支無菌器從1號瓶內(nèi)抽取0.5 ml經(jīng)充分振搖后的水樣注入2號瓶內(nèi)稀釋，充分振搖，待用；
④ 再用一支無菌器從2號瓶中內(nèi)抽取0.5ml經(jīng)充分振搖后的水樣注入3號瓶內(nèi)稀釋，充分振搖，待用；
⑤ 依次類推稀釋直到后一瓶為止，待用。
⑥ 將上述所有稀釋過的測試瓶放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，按表１進行細菌生長的鑒別。

表１　　細 菌 生 長 的 鑒 別 方 法
細菌瓶品種 規(guī)格型號 培養(yǎng)溫度 培養(yǎng) 時間 陽性反應(yīng)特征
細菌總數(shù)測試瓶 KBC—BT 37±2℃ 24±2h 瓶中液體由紅變黃、或液體混濁、或液體表面出現(xiàn)菌膜、或液體底部出現(xiàn)沉淀。
大菌測試瓶 總大菌 KBC—TCB 37±2℃
24±2h
瓶中液體由紫紅變黃
糞大菌 KBC—TCB 44±2℃
腐生菌測試瓶 KBC—TGB 現(xiàn)場采樣溫度±3℃ 24±2h 瓶中液體由紅變黃
鐵細菌測試瓶 KBC—FEB 24 瓶中液體棕色褪去，生成棕色或黑色沉淀
硫酸鹽還原菌測試瓶 KBC—SRB 7H 瓶中無色液體變黑或生成黑色沉淀
2
四、細菌量計量：
１．在一定溫度下培養(yǎng)一定時間后，按瓶號列出稀釋梯度，并據(jù)細菌瓶陽性反應(yīng)的個數(shù)，確定生長指標和級數(shù)（參見附錄及示例）．
２．據(jù)生長指標查表２或表３，確定細菌量基數(shù)并乘以級數(shù)，即為細菌量總數(shù)。
　　　　　　　　細菌量總數(shù)＝細菌量基數(shù)×級數(shù)
二組平行樣重復(fù)試驗查表２
　　三組平行樣重復(fù)試驗查表３
3、細菌量總數(shù)結(jié)果報告示例見表４
五、注意事項
1、測試瓶中若有白色沉淀為過量營養(yǎng)成份，屬正?，F(xiàn)象，不影響測試。
2、常溫條件下，測試瓶儲存期為一年。
3、測試瓶經(jīng)稀釋后，一定要用力振搖1~2分鐘，以測試結(jié)果的準確性。


表２ 二 次 重 復(fù) 細 菌 量 基 數(shù) 表
生 長
指 標 細菌量 基數(shù) (個/ml) 生 長
指 標 細菌量 基數(shù) (個/ml) 生 長
指 標 細菌量基數(shù) (個/ml) 生 長
指 標 細菌量 基數(shù) (個/ml) 生 長
指 標 細菌量基數(shù) (個/ml)
000 0.0 020 0.9 111 2.0 201 5.0 220 25.0
001 0.5 100 0.6 120 2.0 210 6.0 221 70.0
010 0.5 101 1.2 121 3.0 211 13.0 222 110.0
011 0.9 110 1.3 200 2.5 212 20.0







3
例2、
①√ ②√ ③√ ④ ⑤
①／√ ②／√ ③／√ ④／ ⑤／
①＂√ ②＂√ ③＂ ④＂√ ⑤＂
+ + + - -
+ + + - -
+ + - + -
3 2 1

即



則此生長指標為321，級數(shù)為1。查三次重復(fù)計數(shù)表。321對應(yīng)的細菌量為15個/ml。此系列報告結(jié)果為：15×101=150個/ml。
例3、
① ②√ ③ ④ ⑤
①／√ ②／√ ③／√ ④／ ⑤／
①＂ ②＂ ③＂ ④＂ ⑤＂
- + - - -
+ + + - -
- - - - -
1 2 1

即




則此生長指標為121，級數(shù)<0。查三次重復(fù)計數(shù)表。121對應(yīng)的細菌量為1.5個/ml。此系列報告結(jié)果為：≤1.5×100既≤1.5個/ml。
例4、 ①√ ②√ ③√ ④√ ⑤√
①／√ ②／√ ③／√ ④／√ ⑤／√ 即
①＂√ ②＂√ ③＂√ ④＂ ⑤＂
8
附錄
一、 生長指標的確定原則．
１． 部呈陽性反應(yīng)的后一列平行樣應(yīng)為生長指標的*位數(shù)．
２． 同一平行樣，有Ｘ個陽性反應(yīng)瓶，生長指標即為Ｘ．

二、級數(shù)的確定原則
１．部呈陽性反應(yīng)的后一列平行樣的瓶號數(shù)減去１，即為級數(shù)ｎ，以１０ｎ表示．
　?。玻碧柶康模不颍硞€平行樣未部發(fā)生陽性反應(yīng)時，級數(shù)為０，即為１００


示例１
① ② ③ ④ ⑤
+ - - - -
+ + - - -
+ + + - -
生長指標：?。场　。病。?br />
級　　數(shù)：　１００　?。á伲保剑埃?br />
　示例２

① ② ③ ④ ⑤
+ + + - -
+ + + - -
+ + + + +
生長指標：　　　　　３　?。薄。?br />　級　　數(shù)：?。保埃病。á郏保剑玻?br />





5
示例３　

　　　　　　①　?、凇　、邸　、堋　、?br />　　　　　　+　　　+　　-　　　+　　-
　　　　　　+　　　+　　+　　　-　　-
生長指標：　　　　２　?。薄　。?br />級　　數(shù)：　１０１?。á冢保剑保?br />
示例４　

　　　　?、?② ③ ④ ⑤
　　　　　- + - - -
　　　　　+　 -　 +　 -　 -
生長指標：１　 １?。?br />級　　數(shù)：?。保埃啊?br />



















6
細菌測試瓶測試方法及結(jié)果報告示例
例、做三個平行樣重復(fù)試驗，每個樣稀釋5個梯度：
① ② ③ ④ ⑤
①／ ②／ ③／ ④／ ⑤／
①＂ ②＂ ③＂ ④＂ ⑤＂
即分別在① ①／①＂號瓶中注入0.5ml水樣，搖勻后取出0.5ml再分別注入② ②／②＂號瓶中；搖勻后取出0.5ml再分別注入到③ ③／③＂號瓶中，依次類推，直至⑤ ⑤／⑤＂號瓶。
在恒溫下放置一定時間后（大菌群37℃，24小時）觀察測試瓶陽性（變色）反應(yīng)個數(shù)。
例1、（打√者為陽性反應(yīng)---以+表示）
①√ ② ③ ④ ⑤
①／√ ②／√ ③／√ ④／ ⑤／
①＂√ ②＂√ ③＂ ④＂ ⑤＂
+ - - - -
+ + + - -
+ + - - -
3 2 1

即



則此生長指標為321，級數(shù)為0。查三次重復(fù)計數(shù)表。321對應(yīng)的細菌量為15個/ml。此系列報告結(jié)果為：15×100=15個/ml。






7
陽性反應(yīng)，報告結(jié)果應(yīng)注明“≥”，（如例5）。此情況下說明細菌量大，應(yīng)增加測試瓶的個數(shù)，以求得較準確的結(jié)果。
⑤ 測試瓶注入水樣（稀釋）后應(yīng)用力振搖，以結(jié)果的準確性；逐級稀釋水樣時，應(yīng)更換無菌器，以結(jié)果的準確性。


























10
+ + + + +
+ + + - +
+ + + - -
3 1 2

即





則此生長指標為312，級數(shù)為2。查三次重復(fù)計數(shù)表。312對應(yīng)的細菌量為11.5個/ml。此系列報告結(jié)果為：11.5×102個/ml。
例5、①√ ②√ ③√ ④√ ⑤√
①／√ ②／√ ③／√ ④／√ ⑤／√ 即
①＂√ ②＂√ ③＂√ ④＂√ ⑤＂√

+ + + + +
+ + + + +
+ + + + +
3 0 0
即





則此生長指標為300，級數(shù)為4。查三次重復(fù)計數(shù)表。300對應(yīng)的細菌量為2.5個/ml。則此系列報告結(jié)果為≥2.5×104個/ml。
注意事項：
① 做幾個平行樣對應(yīng)查幾次重復(fù)計數(shù)表（即生化檢測方法中的MPN表）。
② 計算公式為：瓶號數(shù)-1=級數(shù)n，即在結(jié)果后應(yīng) ×10n。
如 1號瓶級數(shù)為0級，即在結(jié)果后×100；
2號瓶級數(shù)為1級，即在結(jié)果后×101；
3號瓶級數(shù)為2級，即在結(jié)果后×102；
③ 部陽性反應(yīng)的后一列應(yīng)為生長指標的第1位數(shù)。
如例1中的生長指標第1位數(shù)3對應(yīng)① ①／①＂號瓶
例2中的生長指標第1位數(shù)3對應(yīng)② ②／②＂號瓶
9
例4中的生長指標第1位數(shù)3對應(yīng)③ ③／③＂號瓶
依次類推。
④ 如果*列（① ①／①＂號瓶）未部發(fā)生陽性反應(yīng)，報告結(jié)果應(yīng)注明“≤”，如例3；如果至后一列（⑤ ⑤／⑤＂號瓶）部發(fā)生陽性反應(yīng)，報告結(jié)果應(yīng)注明“≥”，（如例5）。此情況下說明細菌量大，應(yīng)增加測試瓶的個數(shù)，以求得較準確的結(jié)果。
⑤ 測試瓶注入水樣（稀釋）后應(yīng)用力振搖，以結(jié)果的準確性；逐級稀釋水樣時，應(yīng)更換無菌器，以結(jié)果的準確性。


























10
+ + + + +
+ + + - +
+ + + - -
3 1 2

即





則此生長指標為312，級數(shù)為2。查三次重復(fù)計數(shù)表。312對應(yīng)的細菌量為11.5個/ml。此系列報告結(jié)果為：11.5×102個/ml。
例5、①√ ②√ ③√ ④√ ⑤√
①／√ ②／√ ③／√ ④／√ ⑤／√ 即
①＂√ ②＂√ ③＂√ ④＂√ ⑤＂√

+ + + + +
+ + + + +
+ + + + +
3 0 0
即





則此生長指標為300，級數(shù)為4。查三次重復(fù)計數(shù)表。300對應(yīng)的細菌量為2.5個/ml。則此系列報告結(jié)果為≥2.5×104個/ml。
注意事項：
① 做幾個平行樣對應(yīng)查幾次重復(fù)計數(shù)表（即生化檢測方法中的MPN表）。
② 計算公式為：瓶號數(shù)-1=級數(shù)n，即在結(jié)果后應(yīng) ×10n。
如 1號瓶級數(shù)為0級，即在結(jié)果后×100；
2號瓶級數(shù)為1級，即在結(jié)果后×101；
3號瓶級數(shù)為2級，即在結(jié)果后×102；
③ 部陽性反應(yīng)的后一列應(yīng)為生長指標的第1位數(shù)。
如例1中的生長指標第1位數(shù)3對應(yīng)① ①／①＂號瓶
例2中的生長指標第1位數(shù)3對應(yīng)② ②／②＂號瓶
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反應(yīng)，報告結(jié)果應(yīng)注明“≥”，（如例5）。此情況下說明細菌量大，應(yīng)增加測試瓶的個數(shù)，以求得較準確的結(jié)果。
⑤ 測試瓶注入水樣（稀釋）后應(yīng)用力振搖，以結(jié)果的準確性；逐級稀釋水樣時，應(yīng)更換無菌器，以結(jié)果的準確性。