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上海炎熙生物科技有限公司


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極敏型 ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒 低飛克級(jí)靈敏度 發(fā)光信號(hào)持久

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產(chǎn)品型號(hào)ECL-F-500

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-03-16 22:53:57瀏覽次數(shù):710次

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經(jīng)營(yíng)模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:41條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:華經(jīng)理 (經(jīng)理)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

極敏型ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒是化學(xué)發(fā)光系統(tǒng),用于檢測(cè)HRP標(biāo)記的蛋白或核酸,靈敏度高,背景低,檢測(cè)靈敏度可達(dá)低飛克級(jí)乃至飛克級(jí)以下,適用于檢測(cè)極痕量蛋白或核酸。發(fā)光信號(hào)持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),半小時(shí)后仍可維持75%的發(fā)光,便于反復(fù)曝光。
極敏型 ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒 低飛克級(jí)靈敏度 發(fā)光信號(hào)持久

詳細(xì)介紹

極敏型 ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒

Ultra-sensitive Enhanced Chemiluminescence Substrate Kit

 

試劑盒組成:

貨號(hào)

組份

數(shù)量

ECL-F-100

A

50mL

B

50mL

說明書

1

ECL-F-500

A

250mL

B

250mL

說明書

1

 

儲(chǔ)存:建議置于4 ºC避光保存,一年穩(wěn)定。

 

一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介

本試劑盒是化學(xué)發(fā)光系統(tǒng),用于檢測(cè)固定在膜上的蛋白或核酸,靈敏度高,背景低,檢測(cè)靈敏度可達(dá)低飛克(femtogram)級(jí)乃至飛克級(jí)以下,適用于檢測(cè)極痕量蛋白或核酸。發(fā)光信號(hào)持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),半小時(shí)以后仍可維持75%的發(fā)光,便于反復(fù)曝光操作。與其他 ECL 化學(xué)發(fā)光底物相比,可顯著減少樣本及一抗和二抗的使用量。

 

二、原理:

極敏型ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒用于檢測(cè)直接或間接標(biāo)記辣根過氧化物酶(HRP)的抗體、抗原或者核酸。蛋白質(zhì)或核酸在電泳后轉(zhuǎn)移到印跡膜上,以HRP標(biāo)記的抗體或探針結(jié)合膜上的目的蛋白或核酸,洗膜后置于用本產(chǎn)品配制的ECL工作液中,室溫孵育數(shù)分鐘,HRP使工作液中的魯米諾(Luminol)氧化并發(fā)光,試劑中添加的增強(qiáng)配方可以使這種發(fā)光得到*增強(qiáng),從而能夠檢測(cè)更低表達(dá)量的蛋白質(zhì)或核酸。此光經(jīng)X光膠片或者電子裝置感光記錄下來(lái),可清晰顯示蛋白質(zhì)或核酸條帶。

 

三、產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn):

低飛克級(jí)靈敏度——*的靈敏度,能快速檢測(cè)更廣泛的蛋白范圍,可檢測(cè)低飛克級(jí)乃至飛克以下的蛋白量。

信號(hào)穩(wěn)定——發(fā)光時(shí)間較長(zhǎng),能進(jìn)行多次曝光,半小時(shí)以后仍可維持75%的發(fā)光。

信號(hào)強(qiáng)——發(fā)光信號(hào)比對(duì)碘*增強(qiáng)的 HRP-魯米諾檢測(cè)體系得到*增強(qiáng)。

穩(wěn)定性較高——試劑盒可在4度穩(wěn)定存放一年。

節(jié)約抗體——需要更少(稀釋更多)的一抗和二抗,特別節(jié)省抗體(*用量:一抗0.01-0.2 μg/mL,二抗2-10 ng/mL)。

 

四、使用方法:

1. 印跡膜制備:執(zhí)行常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜、HRP標(biāo)記的抗體或者HRP標(biāo)記的核酸探針孵育、洗膜;ECL工作液含有HRP催化的發(fā)光底物,檢測(cè)系統(tǒng)必須基于HRP酶標(biāo)記的抗體或者核酸探針。充分的洗滌對(duì)于降低背景非常重要,所有步驟均在室溫下完成。

2. ECL工作液的配置:在使用前取等量A液和B液,充分混勻后盡快使用;將膜片置混合液中,于室溫下孵育約2分鐘,每平方厘米膜片至少使用0.1-0.2ml以覆蓋全膜片,注意不要在膜片表面形成氣泡。

3.蛋白或核酸信號(hào)顯現(xiàn):

1). 用平頭鑷鉗住膜片,垂直置于吸水紙上以吸去過量試劑,僅留下少量液體覆蓋表面,不可讓膜*干燥;

2). 將膜片置于保鮮膜上,吸附蛋白面朝上,小心趕盡氣泡;

3). 用電子裝置感光,或在暗室中用X光片曝光;

4). 根據(jù)信號(hào)強(qiáng)弱適當(dāng)調(diào)整曝光時(shí)間,也可選擇不同時(shí)間多次曝光,以取得更佳效果。

 

五、安全性:

無(wú)特殊毒性,按普通化學(xué)品處理。如果不慎與眼、皮膚和衣物接觸,請(qǐng)立刻用大量清水沖洗。

 

六、注意事項(xiàng):

1.由于不同品牌的抗體質(zhì)量不同,以及抗體的保存條件和保存時(shí)間的不同,初次使用時(shí)建議對(duì)抗體用量進(jìn)行優(yōu)化,以取得更優(yōu)效果。

2.勿將ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒暴露在陽(yáng)光或強(qiáng)光下,否則易導(dǎo)致其失活;建議保存在棕色瓶中,并避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在陽(yáng)光下,實(shí)驗(yàn)室光照對(duì)試劑盒影響不大;除了X光膠片曝光和洗片處理外,所有步驟均不必在暗室中操作。

3.使用充足的洗滌緩沖液、封閉液、抗體稀釋液和底物工作液去覆蓋印跡膜,以確保印跡膜處于濕潤(rùn)狀態(tài);使用大量的封閉液和洗滌液能減少非特異性信號(hào)的產(chǎn)生。

4.使用前配制ECL工作液,體積足夠覆蓋膜片即可;取A液和B液時(shí)一定要用不同的槍頭,互相污染可能導(dǎo)致緩慢失活;配制完畢建議立即使用工作液,室溫放置數(shù)小時(shí)后仍可使用但靈敏度略有降低;棄去使用過的混合試劑。

5.印跡膜與ECL工作液孵育后約3 min時(shí)發(fā)出的熒光zui強(qiáng),隨后熒光會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而緩慢減弱,至30 min仍可保持約75%的光信號(hào);蛋白點(diǎn)熒光較弱時(shí)可以適當(dāng)延長(zhǎng)曝光時(shí)間;使用過少的ECL工作液不利反應(yīng)進(jìn)行,為達(dá)節(jié)約目的可將膜剪小,但勿降低ECL工作液使用比例。

6.使用*/親和素體系時(shí),避免使用脫脂奶粉作為封閉液,因?yàn)槊撝谭壑泻卸喾N內(nèi)源性*,容易產(chǎn)生非特異性信號(hào)。

7. 避免將多張膜置于同一個(gè)洗膜盒內(nèi)洗膜,相互吸附或摩擦可能造成很深的背景。

8. 金屬氧化物顆??赡軙?huì)造成膜上出現(xiàn)顆粒狀斑點(diǎn),避免使用帶有銹跡的剪刀以及鑷子,建議使用塑料的平頭鑷子。

9.*(NaN3)能抑制HRP活性,應(yīng)避免使用NaN3,如必須使用,濃度不要超過0.01%。

10. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作;戴手套可以避免在膜上留下手印,保持膜的干凈。

11.本產(chǎn)品僅供研究使用。

 

極敏型 ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒 低飛克級(jí)靈敏度 發(fā)光信號(hào)持久

極敏型 ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒 低飛克級(jí)靈敏度 發(fā)光信號(hào)持久

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