［產(chǎn)品名稱］人顆粒酶B（Gzms-B）ELISA檢測(cè)試劑盒
［英文名稱］Human granzymes B,Gzms-B ELISA Kit［貨號(hào)］ZK-H218
［試劑盒］保存條件、保質(zhì)期2-8℃低溫保存下，6個(gè)月的保質(zhì)期。［運(yùn)輸方式］當(dāng)?shù)乜蛻艨梢杂蓪ｉT配送人員免費(fèi)送貨上門貨快遞，外地客戶當(dāng)天下單當(dāng)天免費(fèi)快遞送貨上門。
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人顆粒酶B（Gzms-B）ELISA檢測(cè)試劑盒試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板：一塊(96孔)/（48孔）
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為10 ng/mL，做系列倍比稀釋后，分別稀釋成10 ng/mL，5 ng/mL ，2.5 ng/mL，1.25 ng/mL，0.62 ng/mL，0.31 ng/mL，0.15 ng/mL，其原液直接作為zui高標(biāo)準(zhǔn)濃度，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/mL，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制5 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml 10 ng/mL的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液：1&time20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A：1&time10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B：1&time10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A：1&time120ul/瓶(1：100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1：100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100ul)，實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如1ul檢測(cè)溶液A加99ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B：1&time120ul/瓶(1：100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B1：100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液：1&time10ml/瓶。
9. 濃洗滌液：1&time30ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液：1&time10ml/瓶(2N H2SO4)。
標(biāo)本的采集及保存
1．血清：標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。除空白孔外，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)溶液或待測(cè)樣品100ul，注意不要有氣泡，輕輕混勻，酶標(biāo)板加上蓋，37℃反應(yīng)120分鐘。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。
3. 每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100ul，37℃,60分鐘。洗板3次，350ul/每孔，甩干。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液 100ul，37℃，60分鐘，洗板5次，甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光顯色30分鐘(此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯)。
6. 依序每孔加終止溶液50ul，終止反應(yīng)(此時(shí)蘭色立轉(zhuǎn)黃色)。用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
注：1．每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
2．為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)。
洗板方法
手工洗板方法：吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。ZK-H2879    人絲裂原激活蛋白激酶激酶1(MAP2K1)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1 (MAP2K1) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
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