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液相內(nèi)毒素清除劑/質(zhì)粒提取子科現(xiàn)貨

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所  在  地深圳市

更新時間:2016-07-05 11:58:58瀏覽次數(shù):95次

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液相內(nèi)毒素清除劑/質(zhì)粒提取子科現(xiàn)貨
英文名:DNA-EZ Reagents P Endotoxin-Be-Gone
規(guī)格:5毫升/支
運輸及保存:常溫運輸,4°C 保存
液相內(nèi)毒素清除劑/質(zhì)粒提取子科現(xiàn)貨產(chǎn)品簡介及特點:去除液體生物樣品(包括質(zhì)粒 DNA 樣品)中污染的內(nèi)毒素(endotoxin)具有重要的臨床意義,因為內(nèi)毒素對原代細胞、傳代細胞和整體動物均具有顯著的毒性作用。由于內(nèi)毒素(化學本質(zhì)為脂多糖,即 lipopolysaccharides)是包括 E.coli 在內(nèi)的革蘭氏陰性細菌細胞壁的主要組成成分,并且?guī)щ娦愿?DNA 類似,所以從 E.coli 細胞中提取的質(zhì)粒 DNA 和重組蛋白質(zhì)藥物中常常含有大量的內(nèi)毒素污染,并且很難用用常規(guī)方法(包括硅膠膜吸附,離子交換吸附、凝膠排阻過濾、氯化銫超速離心)去除。子科生物液相內(nèi)毒素清除劑就是專門用于高效去除生物樣品中的內(nèi)毒素污染。
1. 簡單快速,一次處理只需要 20 分鐘左右,不需要復(fù)雜儀器設(shè)備。
2. 高效,一次處理可以去除 90%以上的內(nèi)毒素,經(jīng)過三次重復(fù)抽提可將內(nèi)毒素的水平降低到 0.2 EU (endotoxin unit,約 0.1 ng LPS)/ml 以下。
3. 適用范圍廣,可用于 DNA、RNA、蛋白質(zhì)或其他生物樣品。
4. 不影響 DNA和絕大部分蛋白質(zhì)的活性,處理過的質(zhì)粒 DNA 可用于轉(zhuǎn)染實驗。
5. 既可小規(guī)模使用(在 1.5 ml 離心管內(nèi)),也可放量使用。
使用方法
如果使用前本產(chǎn)品有分層,冰浴后振蕩混勻。
1. 用于體積小于 500 μl 的 DNA/RNA 樣品
a. 在一干凈的離心管中加入 500 μl 的樣品。如果不足 500 μl,可以用水或 TE 補足。
b. 加入 50 μl 的 3 M 醋酸鈉(pH 5.2),混勻后冰浴 5 分鐘。
c. 加入 50 μl 預(yù)冷的本產(chǎn)品,充分混勻后冰浴 10 分鐘。
d. 65°C 水浴直到溶液變濁或出現(xiàn)分層為止(一般需要 1-5 分鐘)。
e. 室溫 12000-15000×g 離心 2 分鐘(不能低溫離心),離心后上層為無色透明,下層為淡藍色。
f. 將上清轉(zhuǎn)移到新的離心管中。
g. 如果需要,可以重復(fù)步驟 c~f。
h. 加 1 倍體積的異丙醇或兩倍體積的乙醇,混勻, 15000×g 離心 30 分鐘。
i. 棄上清后用 70%酒精洗 2 次。
j. 空氣干燥沉淀后加入 100 μl 無內(nèi)毒素的水或 TE 緩沖液溶解沉淀。
k. 測定 DNA 和內(nèi)毒素的含量,與未純化的樣品比較。

2. 用于體積大于 500 μl 的 DNA/RNA 樣品
整個操作同上,只是在 15 或 50 ml 塑料離心管中進行,離心速度不能超過離心管的承受力。
3. 整合到堿變性法質(zhì)粒 DNA 制備過程中整個操作同上,只是:
a. 樣品必須是加溶液 III 離心后得到的上清液。
b. 可以略去第 b 步操作。
c. 第 6 步以后可以重復(fù)步驟 c~f 幾次,也可以直接用試劑盒提供的或自備的上柱液調(diào)整鹽離子濃度,然后上柱,以后的操作按試劑盒提供的操作手冊進行。與柱吸附相關(guān)溶液都必須無內(nèi)毒素污染。
4. 對蛋白質(zhì)和其它生物樣品整個操作同上,只是:
a. 略去第 b 步操作,加 3 M 醋酸鈉(pH 5.2)只為沉淀核酸。
b. 第 d 步改為 37°C 保溫以免蛋白質(zhì)變性,溶液呈混濁狀或分相一般需要 20-30 分鐘。
c. 略去第 h 步和以后操作。

相關(guān)產(chǎn)品如下:L-鳥氨酸鹽酸鹽    L-2,5-二氨基戊酸鹽酸鹽;L-氫氯鳥氨酸;L-鹽酸鳥氨酸;L-鳥糞氨基酸鹽酸鹽;L-Ornithine HCL    BR,99%    25克    3184-13-2    RT
            100克        
            500克        
D-鳥氨酸鹽酸鹽/    (R)-2,5-二氨基戊酸單鹽酸鹽;D-氫氯鳥氨酸;D-Ornithine HCL    BR,98%    1克    16682-12-5    RT
            5克        
            25克        
            100克        
DL-鳥氨酸鹽酸鹽    DL-2,5-二氨基戊酸單鹽酸鹽;DL-氫氯鳥氨酸;DL-Ornithine HCL    BR,98%    1克    1069-31-4    RT
            5克        
            25克        
            100克        
L-鳥氨酸乙酯鹽酸鹽    L-Ornithine Ethylester Dihydrochloride    BR,99%    10克    84772-29    RT
L-天冬氨酸    L-天門冬氨酸;L-氨基丁二酸;L-氨基琥珀酸;L-天冬酸;L-Aspartic acid    BR,99%    100克    56-84-8    RT
            500克        
            1公斤        
L-天門冬鈉    L-天冬氨酸鈉鹽;L-天門冬氨酸鈉鹽;氨基-L-丁二酸一鈉;L-Aspartic acid sodium sal    BR,98%    10克    3792-50-5    RT
            25克        
            100克        
            500克        
L-天門冬氨酸鉀    L-天冬氨酸鉀;Potassium L-Aspartate    BR,98%    10克    1115-63-5    RT
            25克        
            100克        
            500克        
L-天冬氨酸鎂    L-天門冬氨酸鎂;L-Aspartic acid Mg salt    BR,98%    100克    2068-80-6    RT
            500克        
D-天冬氨酸    D-天門冬氨酸;D-天冬酸;D(-)氨基丁二酸;D(-)氨基琥珀酸;二胺基丁二酸;D-Aspartic acid    BR,99%    25克    1783-96-6    RT
            100克        
            500克        
DL-天冬氨酸    DL-天門冬氨酸;DL-天門酸;DL-氨基琥珀酸;DL-2-氨基丁二酸;DL-天冬酸;DL-氨基丁二酸;DL-Aspartic acid    BR,99%    25克    617-45-8    RT
            100克        
            500克        

 

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