人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA檢測試劑盒
?標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
?產(chǎn)品性能:靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性。
?產(chǎn)品包裝:盒(KIT)(含試劑+酶聯(lián)板+覆膜等)
?檢測范圍:詳細(xì)請咨詢在線客服2811391951,或銷售蘇。
人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA檢測試劑盒子科生物現(xiàn)貨供應(yīng),子科生物進(jìn)口elisa試劑盒,國產(chǎn)elisa試劑盒,elisa試劑盒說明書,elisa試劑盒免費(fèi)代測,ELISA試劑盒技術(shù)服務(wù),如需Elisa試劑盒說明書及報(bào)價(jià),可我司。
深圳子科生物提供的ELISA試劑盒產(chǎn)品經(jīng)過實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn)積累可以檢測多種標(biāo)本,參數(shù)指標(biāo)齊全,并可提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)分析,我公司并代理各大進(jìn)口原裝試劑盒,提供品牌有:美國RD、RB、 TSZ、Cloud-clone corp、MP、 Sciencell、Immonoway、ABI,IBL等等,并提供分子生物學(xué)檢測試劑盒、免疫學(xué)檢測試劑盒、金標(biāo)法檢測試劑盒、各品牌*抗體抗原、標(biāo)準(zhǔn)對照品、細(xì)胞菌株、生物培養(yǎng)基、生化試劑、實(shí)驗(yàn)耗材等等多門類上萬種科研產(chǎn)品,歡迎您!
人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA檢測試劑盒中有三個必要的試劑:免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:
1、已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
2、酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
3、酶的底物;
4、陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);
5、結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
6、洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。
實(shí)驗(yàn)測定具體步驟:
1.確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。
4.反應(yīng)后用自動洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時(shí)間供參考,因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時(shí)間會有所不同。此時(shí)肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測定 OD值。
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