人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA檢測試劑盒
?產(chǎn)品規(guī)格:96T(人份)/48T(人份)(單孔檢測分別可以檢測90份樣本,42分樣本,一般都需要留6個孔做標準曲線)。
?標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
?運輸:全國各地快遞免費送貨上門,低溫運輸,用冰袋加泡沫保溫盒包裝,確保產(chǎn)品運輸狀態(tài)下也處于低溫狀態(tài)。
人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA檢測試劑盒子科生物研發(fā)生產(chǎn),深圳子科生物ELISA試劑盒優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商,擁有10年的研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗,擁有*的儀器設(shè)備,專業(yè)的技術(shù)人員和*的實驗技術(shù),目前已經(jīng)建立強大的實驗技術(shù)服務(wù)平臺,品牌設(shè)立為:ZIKER 。
可用作人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA檢測試劑盒測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液)、 細胞培養(yǎng)上清、細胞、組織等均可作標本以測定其中某種成份。有些標本可直接進行測定,有些 則需經(jīng)預(yù)處理。
● 血清:
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。收集上清。如 有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
● 血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右 ( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細收集上清。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心。
●尿液、胸腹水、腦脊液:
用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細收集上清。如有沉淀形成, 應(yīng)再次離心。
●細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細收集 上清。檢測細胞內(nèi)的 成份時,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀釋細胞懸液,細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
●細胞:
檢測細胞的成份時,對于貼壁細胞,去除培養(yǎng)液,用PBS、理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加 入適量裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞10 秒后,細胞 就會被裂解。對于懸浮細胞,離心收集細胞,用PBS、理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍.加入適 量裂解液, 用槍吹打把細胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉 淀。如果細胞量較多,必需分裝然后再裂解。充分裂解后,10000-14000g離心3-5 分鐘,取上 清,即可進行后續(xù)操作。
●組織標本:
切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS 或組織蛋白萃取試劑,緩沖液中可加入蛋白酶抑制 劑。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細收集 上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。除空白孔外,余孔分別加標準溶液或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,輕輕混勻,酶標板加上蓋,37℃反應(yīng)120分鐘。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。
3. 每孔加檢測溶液A工作液 100ul,37℃,60分鐘。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
4. 每孔加檢測溶液B工作液 100ul,37℃,60分鐘,洗板5次,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色30分鐘(此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯)。
6. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng)(此時蘭色立轉(zhuǎn)黃色)。用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
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1,25-二羥基維生素D3(DHVD3) ELISA Kit 96T 48T 12.35-1000 pg/mL 4.1 pg/mL general 1,25-Dihydroxyvitamin D3 (DHVD3) ELISA Kit General
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