產(chǎn)品名稱：人異粘蛋白(MTDH)ELISA檢測試劑盒
英文名稱：human Metadherin (MTDH) ELISA Kit
貨號(hào)：ZK-H2969
規(guī)格： 96T/48T
保存條件：保質(zhì)期2-8℃低溫保存下，6個(gè)月的保質(zhì)期。
運(yùn)輸方式：當(dāng)?shù)乜蛻艨梢杂蓪ｉT配送人員免費(fèi)送貨上門貨快遞，外地客戶當(dāng)天下單當(dāng)天免費(fèi)快遞送貨上門。
技術(shù)服務(wù)：凡購買子科生物任何一款ELISA酶聯(lián)免疫分析檢測試劑盒，都可以享受免費(fèi)代測服務(wù)，外地客戶可以由技術(shù)老師的指導(dǎo)下正確放置好樣本的保存方式后快遞郵寄到我公司技術(shù)部，本地客戶可以享受免費(fèi)上門取樣服務(wù)！

實(shí)驗(yàn)所涉及到的儀器如下：酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、離心機(jī)、培養(yǎng)箱

酶標(biāo)比色儀介紹：
酶標(biāo)比色儀簡稱酶標(biāo)儀，通常指于測讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對固相載體形式的不同，各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。許多試劑公司配套供應(yīng)酶標(biāo)儀。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有：測讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、精確度和可測范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可精確到0.001，準(zhǔn)確性為lusm1%，重復(fù)性達(dá)0.5%。舉例說，若某孔測得的A值為1.083，則該孔相對于空氣的真實(shí)A值應(yīng)為1.083lusm0.01(1.073~1.093)，復(fù)測定數(shù)次，其A值均應(yīng)1.083lusm0.05(1.078~1.088)在之間。酶標(biāo)儀的可測范圍視各酶標(biāo)儀的性能而不同。普通的酶標(biāo)儀在0.000~2.000，新型號(hào)的酶標(biāo)儀上限拓寬達(dá)2.900，甚至更高。超出可測上限的A值常以"*"或"over"或其它符號(hào)表示。應(yīng)注意可測范圍與線性范圍的不同，線性范圍常小于可測范圍，比如某一酶標(biāo)儀的可測范圍為0.000~2.900，而其線性范圍僅0.000~2.000，這在定量ELISA中制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)予注意。
酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽光或強(qiáng)光照射下，操作時(shí)室溫宜在15~30℃，使用前先預(yù)熱儀器15-30分鐘，測讀結(jié)果更穩(wěn)定。測讀A值時(shí)，要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰，如OPD用492nm波長。有的酶標(biāo)儀可用雙波長式測讀，即每孔先后測讀兩次，*次在zui適波長(W1)，第二次在不敏感波長(W2)，兩次測定間不移動(dòng)ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1，630nm為W2，zui終測得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。各種酶標(biāo)儀性能有所不同，使用中應(yīng)參考對應(yīng)儀器說明書。

人異粘蛋白(MTDH)ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)測定具體步驟：
1．確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目，并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9；做雙份檢測時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。 
2．將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清，直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。 
3．酶標(biāo)板加上蓋，37℃反應(yīng) 90 分鐘。 
4．反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體；或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體，再對著吸水紙拍幾下。 不洗。 
5．將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。（TMB 空白顯色孔除 外）。37℃反應(yīng) 60 分鐘。 
6． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次，每次浸泡 1 分鐘左右。 
7．將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入（TMB 空白顯色孔除外）。37℃反應(yīng) 30 分鐘。 
8． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次，每次浸泡 1-2 分鐘左右。 
9．按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液，37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 （注意：顯色時(shí)間供參考，因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異，顯色時(shí)間會(huì)有所不同。此時(shí)肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色，后 3-4 孔差別不明顯）。 
10．按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。 
11．用酶標(biāo)儀在 450nm 測定 OD值。

人異粘蛋白(MTDH)ELISA檢測試劑盒全蛋白提取試劑盒    50
    100
活性蛋白提取試劑盒    50
    100
線粒體蛋白提取試劑盒    50
    100
核蛋白與胞漿蛋白抽提試劑盒    50
    100
Western及IP細(xì)胞裂解液    100ml
RIPA裂解液(強(qiáng))    100ml
RIPA裂解液(中)    100ml
RIPA裂解液(弱)    100ml
NP-40裂解液    100ml
SDS裂解液    100ml
Bradford蛋白濃度測定試劑盒    50ml
    100ml
BCA蛋白濃度測定試劑盒    50ml
    100ml
    
蛋白提取和SDS-Page凝膠電泳試劑盒    25
Western Blotting檢測試劑盒    10
    20
SDS-PAGE凝膠配制試劑盒    25
    50
5×SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液     1mL
10×SDS-PAGE電泳液    500mL
10×電轉(zhuǎn)移緩沖液    500mL
麗春紅染色液    25mL
WB封閉液    100mL
`WB一抗稀釋液    100mL
WB二抗稀釋液     100mL
10×WB洗滌液    100mL
抗體清除液     500mL
HRP顯色液（DAB）    5mL
考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(常規(guī)法)    100ml
ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒    50ml
    100ml
蛋白酶抑制劑混合物cocktails(1000×)    100μL
磷酸酶抑制劑混合物cocktails(100×)    1mL
1M DTT    100μL
PMSF(100mM)    1mL
羊抗兔 IgG-HRP    100μL
羊抗小鼠 IgG-HRP    100μL
兔抗羊 IgG-HRP    100μL