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白細胞介素,簡稱白介素,是指在白細胞或免疫細胞間相互作用的淋巴因子,它和血細胞生長因子同屬細胞因子。兩者相互協(xié)調,相互作用,共同完成造血和免疫調節(jié)功能。白細胞介素在傳遞信息,激活與調節(jié)免疫細胞,介導T、B細胞活化、增殖與分化及在炎癥反應中起重要作用。
白細胞介素是由多種細胞產生并作用于多種細胞的一類細胞因子。由于初是由白細胞產生又在白細胞間發(fā)揮作用,所以由此得名,現(xiàn)仍一直沿用。初指由白細胞產生又在白細胞間起調節(jié)作用的細胞因子,現(xiàn)指一類分子結構和生物學功能已基本明確,具有重要調節(jié)作用而統(tǒng)一命名的細胞因子,它和血細胞生長因子同屬細胞因子。兩者相互協(xié)調,相互作用,共同完成造血和免疫調節(jié)功能。白細胞介素在傳遞信息,激活與調節(jié)免疫細胞,介導T、B細胞活化、增殖與分化及在炎癥反應中起重要作用。
白介素elisa試劑盒使用須知:
1、標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7、溫育:操作同3。
8、洗滌:操作同5。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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