上海研盟生物科技有限公司Anti-MLCK抗體*,主要應用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細胞術等實驗中。說明書隨貨發(fā)送,您也可以直接我司在線客服索取。客服
肌球蛋白輕鏈激酶抗體,Anti-MLCK抗體簡單介紹:
中文名稱:肌球蛋白輕鏈激酶抗體
英文名稱:Anti-MLCK antibody
產品別名:myosin light chain kinase; DKFZp686I10125; EC 2.7.11.18; FLJ12216; Kinase related protein; KRP; MLCK; MLCK1; MLCK108; MLCK210; MSTP083; MYLK; MYLK1; Myosin light chain kinase smooth muscle and non muscle isozymes; Myosin light polypeptide kinase; OTTHUMP00000180642; OTTHUMP00000180643; smMLCK; Smooth muscle myosin light chain kinase; okin; deglutamylated form; MLCK; MYLK_HUMAN.
產品規(guī)格:0.1ml、0.2ml、1ml
產品用途:科研實驗
產品價格:請報價
說明書:請?zhí)砑涌头苯铀魅?/p>
抗體來源:該指標有兩種產品,一種是兔來源抗體,一種是鼠來源抗體
克隆類型:兔來源為多克隆抗體,鼠來源單克隆抗體
交叉反應:請索取說明書查看
背景介紹:This gene, a muscle member of the immunoglobulin gene superfamily, encodes myosin light chain kinase which is a calcium/calmodulin dependent enzyme. This kinase phosphorylates myosin regulatory light chains to facilitate myosin interaction with actin filaments to produce contractile activity. This gene encodes both smooth muscle and nonmuscle isoforms. In addition, using a separate promoter in an intron in the 3' region, it encodes okin, a small protein identical in sequence to the C-terminus of myosin light chain kinase, that is independently expressed in smooth muscle and functions to stabilize unphosphorylated myosin filaments. A pseudogene is located on the p arm of chromosome 3. Four transcript variants that produce four isoforms of the calcium/calmodulin dependent enzyme have been identified as well as two transcripts that produce two isoforms of okin. Additional variants have been identified but lack full length transcripts.
性 狀:Lyophilized or Liquid
濃 度:1mg/1ml
亞 型:IgG
肌球蛋白輕鏈激酶抗體保存條件: Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
純化方法: affinity purified by Protein A
儲 存 液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol
多抗親和層析純化
多抗的純化是一件比較簡單的事情,因為人工干預比較大,所以對實驗者的操作依賴性較強。很多新手覺得這是一件比較復雜困難的工作,但是如果理解了原理,就可以自行改進實驗了。多抗純化方法比較多,過去有用鹽析法純化的,有用辛酸-硫酸銨沉淀的方式純化的,也有用冷酒精沉淀的方式純化的,也有后來的離子交換層析和Protein A、G、A/G 純化的,但是在今天,市場上幾乎所有的抗體都是通過抗原親和純化得到的,與其它方法相比,抗原親和層析得到的抗體效率高、產量高、產品純、操作簡單。鑒于很多網友問起這方面的問題,我就詳細地講一講親和純化原理和操作。
說到親和層析,還得從上個世紀60年代說起。當年美國NIH(National Institutes of Health)
有個學生在研究一種酶和抑制劑之間的相互作用的時候,突發(fā)奇想:既然此酶可以和抑制劑結合,那如果把抑制劑固定起來,不就可以用來純化酶了嗎?試了一下覺得果然可行于是發(fā)了論文,從那之后,就出現了各種各樣的親和層析,親和配基與配體可以是酶與底物、酶與抑制劑、激素與受體、抗原和抗體、糖蛋白與凝集素、*與親和素、*與二價金屬離子、卟啉環(huán)與亞鐵離子等。親和層析精髓:將一種分子固定,用來吸附另一種特異性分子,zui后將其洗脫下來。
言規(guī)正傳,多抗的親和層析是基于抗原與抗體結合的一種層析方式?;舅悸肥菍⒖乖潭ㄔ谝环N基質(也就是柱的填料,大家都叫介質或beads)上,然后與抗血清孵育以捕獲相應的抗體,然后從基質上洗掉非特異性結合的抗體,zui后再將抗體洗脫下來。
肌球蛋白輕鏈激酶抗體,Anti-MLCK抗體免疫組化問題解答:
1 染色過強
原因 解決方法
a 抗體濃度過高或孵育時間過長 降低抗體滴度、抗體孵育時間:室溫1小時或4度過ye
b 孵育溫度過高超過37度 一般在室溫20-28度
c DAB顯色時間過長或濃度過高 顯色時間不超過5-12分鐘,以顯微鏡下觀察為準
2 非特異性背景染色
原因 解決方法
a 操作過程中沖洗不充分 每步沖洗3次每次5分鐘
b 組織中含過氧化物酶未阻斷 可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時間延長
c 組織中含內原性* 正常非免疫動物血清再封閉
d 血清蛋白封閉不充分 延長血清蛋白封閉時間
3 染色弱
原因 解決方法
a 抗體濃度過低、孵育時間過短 提高抗體濃度、孵育時間不能少 于60分鐘
b 試劑超過有效使用時間 應更換試劑
c 操作中添加試劑時緩沖液未瀝干 每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液
使試劑稀釋 (應防止切片干燥)
d 室溫太低 低于15度 要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4 度冰箱過夜
e 蛋白封閉過度 封閉不要超過12分鐘
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