上海研盟生物科技有限公司Anti-Lens culinaris agglutinin抗體*,主要應(yīng)用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)中。說(shuō)明書隨貨發(fā)送,您也可以直接我司在線客服索取??头?/p>
扁豆凝集素,Anti-Lens culinaris agglutinin抗體簡(jiǎn)單介紹:
中文名稱:扁豆凝集素
英文名稱:Anti-Lens culinaris agglutinin antibody
產(chǎn)品別名:LCA/Lens culinaris agglutinin; LEC_LENCU.
產(chǎn)品規(guī)格:0.1ml、0.2ml、1ml
產(chǎn)品用途:科研實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品價(jià)格:請(qǐng)報(bào)價(jià)
說(shuō)明書:請(qǐng)?zhí)砑涌头苯铀魅?/p>
抗體來(lái)源:該指標(biāo)有兩種產(chǎn)品,一種是兔來(lái)源抗體,一種是鼠來(lái)源抗體
克隆類型:兔來(lái)源為多克隆抗體,鼠來(lái)源單克隆抗體
交叉反應(yīng):請(qǐng)索取說(shuō)明書查看
背景介紹:Clathrin is a major cytosolic coat protein in pits and vesicles originating from the plasma membrane and the trans-Golgi network. In receptor-mediated endocytosis, receptor proteins are engulfed by clathrin-coated vesicles. Clathrin is composed of three heavy chains and three light chains which associate non-covalently to form a triskelion structure. Clathrin light chain regulates the self-assembly of triskelions onto intracellular membranes. Clathrin light chain subunits (LCA and LCB) contribute to regulation of coated vesicle formation to sort proteins during receptor-mediated endocytosis and organelle biogenesis. Although LCA and LCB are encoded by two discrete genes sharing only 60% homology, they have certain features in common. Both LCA and LCB undergo alternative mRNA splicing, which results in the generation of tissue-specific isoforms. Additionally, in the brain, LCA and LCB contain inserted sequences that form higher molecular weight isoforms. These sequences insert at similar cytoplasmic domain encoding regions for both LCA and LCB.
性 狀:Lyophilized or Liquid
濃 度:1mg/1ml
亞 型:IgG
扁豆凝集素保存條件: Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
純化方法: affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol
多抗親和層析純化
多抗的純化是一件比較簡(jiǎn)單的事情,因?yàn)槿斯じ深A(yù)比較大,所以對(duì)實(shí)驗(yàn)者的操作依賴性較強(qiáng)。很多新手覺得這是一件比較復(fù)雜困難的工作,但是如果理解了原理,就可以自行改進(jìn)實(shí)驗(yàn)了。多抗純化方法比較多,過去有用鹽析法純化的,有用辛酸-硫酸銨沉淀的方式純化的,也有用冷酒精沉淀的方式純化的,也有后來(lái)的離子交換層析和Protein A、G、A/G 純化的,但是在今天,市場(chǎng)上幾乎所有的抗體都是通過抗原親和純化得到的,與其它方法相比,抗原親和層析得到的抗體效率高、產(chǎn)量高、產(chǎn)品純、操作簡(jiǎn)單。鑒于很多網(wǎng)友問起這方面的問題,我就詳細(xì)地講一講親和純化原理和操作。
說(shuō)到親和層析,還得從上個(gè)世紀(jì)60年代說(shuō)起。當(dāng)年美國(guó)NIH(National Institutes of Health)
有個(gè)學(xué)生在研究一種酶和抑制劑之間的相互作用的時(shí)候,突發(fā)奇想:既然此酶可以和抑制劑結(jié)合,那如果把抑制劑固定起來(lái),不就可以用來(lái)純化酶了嗎?試了一下覺得果然可行于是發(fā)了論文,從那之后,就出現(xiàn)了各種各樣的親和層析,親和配基與配體可以是酶與底物、酶與抑制劑、激素與受體、抗原和抗體、糖蛋白與凝集素、*與親和素、*與二價(jià)金屬離子、卟啉環(huán)與亞鐵離子等。親和層析精髓:將一種分子固定,用來(lái)吸附另一種特異性分子,zui后將其洗脫下來(lái)。
言規(guī)正傳,多抗的親和層析是基于抗原與抗體結(jié)合的一種層析方式?;舅悸肥菍⒖乖潭ㄔ谝环N基質(zhì)(也就是柱的填料,大家都叫介質(zhì)或beads)上,然后與抗血清孵育以捕獲相應(yīng)的抗體,然后從基質(zhì)上洗掉非特異性結(jié)合的抗體,zui后再將抗體洗脫下來(lái)。
扁豆凝集素,Anti-Lens culinaris agglutinin抗體免疫組化問題解答:
1 染色過強(qiáng)
原因 解決方法
a 抗體濃度過高或孵育時(shí)間過長(zhǎng) 降低抗體滴度、抗體孵育時(shí)間:室溫1小時(shí)或4度過ye
b 孵育溫度過高超過37度 一般在室溫20-28度
c DAB顯色時(shí)間過長(zhǎng)或濃度過高 顯色時(shí)間不超過5-12分鐘,以顯微鏡下觀察為準(zhǔn)
2 非特異性背景染色
原因 解決方法
a 操作過程中沖洗不充分 每步?jīng)_洗3次每次5分鐘
b 組織中含過氧化物酶未阻斷 可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時(shí)間延長(zhǎng)
c 組織中含內(nèi)原性* 正常非免疫動(dòng)物血清再封閉
d 血清蛋白封閉不充分 延長(zhǎng)血清蛋白封閉時(shí)間
3 染色弱
原因 解決方法
a 抗體濃度過低、孵育時(shí)間過短 提高抗體濃度、孵育時(shí)間不能少 于60分鐘
b 試劑超過有效使用時(shí)間 應(yīng)更換試劑
c 操作中添加試劑時(shí)緩沖液未瀝干 每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液
使試劑稀釋 (應(yīng)防止切片干燥)
d 室溫太低 低于15度 要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4 度冰箱過夜
e 蛋白封閉過度 封閉不要超過12分鐘
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