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大鼠趨化因子CX3C基元配體1(CX3CL1)ELISA試劑盒廠家ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái)，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。

方法一：用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法：
1.　包被：用0.05M PH9，碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml，在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過(guò)夜ye。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。
2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml，37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。
方法二：用于檢測(cè)未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜ye。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)，洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗體)0.1ml，37℃孵育30～60分鐘，洗滌，zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。

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技術(shù)問(wèn)答：

問(wèn)：不同盒子里的孔下次能不能用？

答：一個(gè)盒子有96孔和48的 要是真的用不完或標(biāo)本不多的情況下，做點(diǎn)處理后在存放。

問(wèn)：做出來(lái)的結(jié)果：標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度呈線性回歸，但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近，正常未予干預(yù)的大鼠血漿都基本沒(méi)有表達(dá)，這是什么原因？

 答：樣本、稀釋、室控和機(jī)器操作等，原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近，好像熒光法里面有種試劑盒可以檢測(cè)滴度。

問(wèn)：收集血清的時(shí)候用什么管？

答：普通離心管即可。