細(xì)胞名稱(chēng):人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17*
細(xì)胞形態(tài): 細(xì)胞株
生長(zhǎng)特性:貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時(shí)間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
儲(chǔ)存:液氮
保存與運(yùn)輸: 干冰常溫運(yùn)輸
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)
也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17*細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生*的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶(hù)自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
高純度瓊脂(Purified Agar)Oxoid500g
Peptone Bacteriological Neutralised 中性細(xì)菌學(xué)蛋白胨Oxoid500g
Peptone MycologicaL 真菌蛋白胨Oxoid500g
Casein Hydrolysate(Acid)/酪蛋白水解物(酸解) 現(xiàn)貨Oxoid500g
胰蛋白胨T(Tryptone T)Oxoid500g
中性大豆蛋白胨(Soya Peptone Neutralised)Oxoid400g
胰蛋白示(Trytose)Oxoid500g
乳清蛋白水解物(Lactalbumin Hydrolysate)Oxoid500g
Peptone P 蛋白胨POxoid500g
膽鹽(Bile Salts)Oxoid250g
3 號(hào)膽鹽(Bile Salts No.3)Oxoid250g
乳糖(細(xì)菌用) Lactose BacteriologicalOxoid500g
細(xì)菌學(xué)葡萄糖 (LP0071)Oxoid
Peptone Special 特殊蛋白胨Oxoid500g
示蛋白胨(Proteose Peptone)Oxoid500g
*鈉 (LP0124)Oxoid
一號(hào)植物蛋白胨 Vegetable Peptone Oxoid500g
植物蛋白胨肉湯 Vegetable Peptone BrothOxoid500g
植物蛋白胨磷酸鹽肉湯 (VG0200)Oxoid
非轉(zhuǎn)基因大豆蛋白胨(GMO-Free Soya Peptone)Oxoid500g
Nutrient Agar 營(yíng)養(yǎng)瓊脂Oxoid500g
Nutrient Agar Tablets 營(yíng)養(yǎng)瓊脂片劑Oxoid100片
麥康凱肉湯 (CM0005)Oxoid
麥康凱瓊脂 (CM0007)Oxoid
蛋白胨水Peptone WaterOxoid500g
LAB-LEMCO( ) 肉湯 Lab-Lemco BrothOxoid500g
LAB-LEMCO( ) 瓊脂 Lab-Lemco AgarOxoid500g
酵母提取物瓊脂(CM0019)Oxoid
牛奶瓊脂 (CM0021)Oxoid
巰基醋酸鹽培養(yǎng)基(Brewer) (CM0023)Oxoid
改良愛(ài)德華培養(yǎng)基(CM0027)Oxoid
2%亮綠膽汁肉湯(CM0031)Oxoid
Kligler 鐵瓊脂 (CM0033)Oxoid
脫氧膽酸鹽檸檬酸鹽瓊脂 (CM0035)Oxoid
沙保氏葡萄糖瓊脂 (CM0041)Oxoid
MRVP 培養(yǎng)基 (Clarks and Lubs 培養(yǎng)基) (CM0043)Oxoid
瓊脂片劑 (3號(hào)瓊脂)(CM0049)Oxoid
尿素瓊脂基礎(chǔ) (Christensen 瓊脂基礎(chǔ)) (CM0053)Oxoid
血瓊脂基礎(chǔ) (CM0055)Oxoid
麥芽浸膏肉湯 (CM0057)Oxoid
麥芽浸膏瓊脂 (CM0059)Oxoid
蛋白胨水 (Andrade)Oxoid
Nutirent Broth No.2 2 號(hào)營(yíng)養(yǎng)肉湯Oxoid500g
伊紅美蘭瓊脂 (Levine 培養(yǎng)基) (CM0069)Oxoid
尿素肉湯基礎(chǔ) (Christensen 瓊脂基礎(chǔ)) (CM0071)Oxoid
葡萄糖胰蛋白胨肉湯 (CM0073)Oxoid
葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 (CM0075)Oxoid
Liver Broth 肝肉湯Oxoid500G
庖肉培養(yǎng)基 (CM0081)Oxoid
Hoyle培養(yǎng)基基礎(chǔ) (CM0083)Oxoid
甘露糖鹽瓊脂 (Chapman 培養(yǎng)基) (CM0085)Oxoid
胰蛋白胨水 Tryptone Water(CM0087)Oxoid500g
鹽肉肉湯 (CM0094)Oxoid
Czapek Dox 液體培養(yǎng)基 (CM0095)Oxoid
改良Czapek Dox 瓊脂 (CM0097)Oxoid
SS 瓊脂 (CM0099)Oxoid
玉米粉瓊脂 (CM0103)Oxoid
紫紅膽汁 (乳糖) 瓊脂 (CM0107)Oxoid
2號(hào)麥康凱瓊脂(CM0109)Oxoid
Stuart * (CM0111)Oxoid
西紅柿汁瓊脂 (CM0113)Oxoid
3號(hào)麥康凱瓊脂(麥康凱瓊脂(US 配方)) (CM0115)Oxoid
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