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操作流程如下：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

我司提供免費(fèi)代測服務(wù)，凡購買我司試劑盒的用戶，只收取試劑盒的費(fèi)用,其他輔助試劑全部免費(fèi)。我們將根據(jù)實(shí)驗(yàn)工作量和難易程度，雙方協(xié)定實(shí)驗(yàn)周期，保質(zhì)保量完成委托實(shí)驗(yàn)，并將實(shí)驗(yàn)結(jié)果和材料用特快專遞免費(fèi)寄送到您手中。

從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。

公司采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無效包退包換，公司提供免費(fèi)代測服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。

實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)：

1、所有試劑不能與皮膚直接接觸。

2、務(wù)必使用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，不準(zhǔn)用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。

3、取完一種試劑后，應(yīng)將工具洗凈、擦干后，方可取用另一種試劑。

4、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后將瓶放回原處。

5、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。

實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品圖：

40 ng/L，5號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

20 ng/L，4號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10 ng/L，3號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

5 ng/L，2號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.5 ng/L，1號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

標(biāo)本的采集與保存：

1、血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時(shí)或4oC 過夜，然后1000×g 離心20 分鐘，取上清即

可，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2、血漿：用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘，

取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、組織勻漿：

1） 取適量組織塊，于預(yù)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；

2） 可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨，該過程需在冰上進(jìn)行（有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿）；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理（超聲破碎過

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，已獲得國家承認(rèn)的“三證"，每一個(gè)產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風(fēng)濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時(shí)，可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解；

補(bǔ)體的控制方法：

①用EDTA稀釋標(biāo)本；

②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；

2.外源性干擾因素：包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時(shí)間過長或凝固不全等；

控制方法：采血時(shí)規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標(biāo)本時(shí)采用無菌試管，經(jīng)檢測后再低溫凍存；保存時(shí)間不宜過久，檢測時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本；對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清。

酸甲酯 75.0% (GC)焦鈉 AR,99.0%anti-RV(Human anti-rabies virus antibody) ELISA Kit  人抗狂犬病抗體

月桂烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥90%焦鈉 CP,97.0%anti-HAV(Human anti-hepatitis A virus IgM antibody) ELISA Kit  人抗甲型肝炎病IgM抗體

月桂烯 ≥90.0% (GC)焦鈉 ACSanti-HAV(Human anti-hepatitis A virus IgG antibody) ELISA Kit  人抗甲型肝炎病IgG抗體

棕櫚油酸甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品鈉,十二水 ≥99.99% metals basisanti-PIV IgM(Human anti-parainfluenza virus IgM antibody) ELISA Kit  人抗副流感病IgM抗體

桑色素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98鈉,十二水  ACS, ≥98%anti-HDV(Human anti-hepatitis D virus antibody) ELISA Kit  人抗丁型肝炎病抗體

酮  分析標(biāo)準(zhǔn)品鈉,十二水  CP,97.0%Human anti-HCV ELISA Kit  人抗型肝炎病抗體

十六碳烯酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品鈉,十二水 AR,98.0%Human anti-typhus antibody ELISA Kit  人抗斑疹傷寒抗體

甲基反甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品氫二鈉,無水 AR，99%LLO(Human listeriolysin O) ELISA Kit  人單核增多性李斯特菌素O

INSRA胰島素受體α酶聯(lián)免疫試劑盒人參皂苷Rh1 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%小鼠牙本質(zhì)質(zhì)蛋白1(DMP1)免疫試劑盒乙脫氫2型抗體Transcription factor 25/Nulp1  核轉(zhuǎn)錄因子25抗體

人參皂苷Rf 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%小鼠循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)免疫試劑盒γ-氨丁脫氫抗體Transaldolase 1  轉(zhuǎn)抗體

人參皂苷Rb3 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)免疫試劑盒衰老相關(guān)蛋白5抗體TRAK1  驅(qū)動蛋白結(jié)合蛋白1抗體

異正丁酯 98%小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)免疫試劑盒化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體TRAILR2/DR5/CD262  腫瘤調(diào)亡素/死亡受體5抗體

乙異烯酯 99%小鼠血小板衍生生長因子CC(PDGF-CC)免疫試劑盒釉質(zhì)蛋白抗體TRAILR1/DR4/APO2  死亡受體4抗體

印刷膠帶,用于封裝紙箱,60m*60mm*0.057mm小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒化腺苷單活化蛋白激α2抗體TRAIL  腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體抗體

2-氨-5-二酮 98%小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)免疫試劑盒化腺苷單活化蛋白激α2抗體TRAF7  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子7抗體

2-氨-5-硝二酮 98%小鼠血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)免疫試劑盒化雄激素受體抗體TRAF6  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體

 99%小鼠血小板生成素(TPO)免疫試劑盒化雄激素受體抗體TRAF4/CART 1  腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白4抗體

二酮腙 98%小鼠血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒化雄激素受體抗體TRAF3/CD40bp  腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體

 99%小鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)免疫試劑盒化雄激素受體抗體TRAF1  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體

2-氨-5-二酮  99%小鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激ANKK1抗體TRADD  腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體

2--5-硝二酮  98%小鼠血纖蛋白原γ鏈(FGG)免疫試劑盒化內(nèi)收蛋白抗體TRAC1/RNF125  環(huán)指蛋白125抗體

2--5- 99%小鼠血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒膜粘連蛋白11抗體TRA16  激素受體相關(guān)蛋白16抗體

2-二酮 99%小鼠血纖蛋白(fibrin)免疫試劑盒膜粘連蛋白13抗體TRA16  激素孤兒受體相關(guān)蛋白抗體