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從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：INDO吲哚胺酶聯(lián)免疫試劑盒

英文名稱：INDO ELISA Kit

規(guī)格：48T/96

貨號(hào)：CS-2073E

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..

試劑盒組成及試劑配制：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

試劑準(zhǔn)備：

1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

注意事項(xiàng)：

1.試劑盒使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請廢棄。

2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。

（加熱溫度不要超過50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。

4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。

5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。

6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時(shí)建議作雙孔檢測。

7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。

8. 試驗(yàn)中請穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。

大鼠煙堿型乙酰受體Anti-OR10G9 Antibody人基質(zhì)金屬蛋白9（MMP-9）elisa定量檢測試劑盒

小鼠破骨分化因子Anti-OR10H2 Antibody人晶體蛋白（CLC）elisa定量檢測試劑盒

大鼠蕈堿型乙酰受體Anti-OR10H3 Antibody人鋅結(jié)合α2-糖蛋白1（AZGP1）elisa定量檢測試劑盒

小鼠Toll樣受體9Anti-OR10H4 Antibody人抗酸性（ACP5）elisa定量檢測試劑盒

人基質(zhì)衍生因子1βAnti-OR10J3 Antibody人黑色素瘤標(biāo)記物（MART/Melan-A）elisa定量檢測試劑盒

人干因子受體Anti-OR10J5 Antibody人白三烯A4水解（LTA4H）elisa定量檢測試劑盒

小鼠鉤端螺旋體IgGAnti-OR10J1 Antibody人肌腱蛋白R(shí)（TNR）elisa定量檢測試劑盒

大鼠活化蛋白CAnti-OR10J6P Antibody人抗肝特異性脂蛋白（LSP）elisa定量檢測試劑盒

INDO吲哚胺酶聯(lián)免疫試劑盒L-半胱氨鹽鹽 非動(dòng)物源,用于培養(yǎng)，EP, USP富含亮氨重復(fù)神經(jīng)元5抗體DEDD2  死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體

L-組氨鹽鹽，一水 99%親脂性蛋白B抗體DEDD1  死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體

L-組氨 99%癌癥亮氨拉鏈下調(diào)因子1抗體DECTIN-1/CLECSF12/beta Glucan Receptor  β葡聚糖受體抗體

L-組氨 EP, USP ，非動(dòng)物源,用于培養(yǎng)賴氨酰氧化相關(guān)蛋白2抗體DECTIN 2  C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族6成員A抗體

L-組氨 99.5%膜聚糖蛋白抗體DECR1  線粒體2,4-雙烯酰輔A還原1抗體

L-賴氨鹽鹽 99%李斯特菌溶胞素抗體DEC-205/CD205/Ly75  淋巴抗原75抗體

L-硫氨 99%亮氨羧轉(zhuǎn)移1抗體DEAF1/Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1  畸形表皮自調(diào)節(jié)因子1抗體

S--L-半胱氨 98%原癌因2抗體DDX58  DDX58抗體

L-鳥氨鹽鹽 98%賴氨酰氧化樣蛋白4抗體DDX53/CT26  腫瘤/抗原26抗體

L-酪氨 99%鐵蛋白抗體DDX43/CT13  腫瘤/抗原13抗體

6-氨-1-己  97%層粘連蛋白1+2抗體DDX4/MVH  DDX4抗體

3,4-二溴噻吩 97%富含亮氨重復(fù)蛋白15抗體DDX19B/DBP5  解旋DEAD5抗體

羥-O-磺 97%受體蛋白酪氨F抗體DDRGK1  DDRGK1蛋白抗體

6-羥 98%化5-脂氧合抗體DDIT4L  DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體

4-羥 98%低分子質(zhì)量蛋白2抗體DDIT4/REDD1  DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體

操作步驟：

1.編號(hào)：將樣品對應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。