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參數規(guī)格：
產品名稱：PCR檢測試劑盒
產品貨號：CP100320
產品規(guī)格：48T  0.1PCR管/48T   0.2PCR管
產品分類：PCR-熒光探針法
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
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二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
運動節(jié)桿菌Rab5激活蛋白6抗體Human WDR21C ELISA Kit雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)免疫試劑盒

產黃青霉NuBI蛋白結合蛋白1抗體Human WDR61 ELISA Kit猴ELISA試劑盒

藍伏革菌GSDML蛋白抗體Human WDR19/IFT144 ELISA Kit猴組(HIS)免疫試劑盒

畢赤酵母磷酸化GATA結合蛋白2抗體Human WDR20 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體3(TRAIL-R3)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷酸化GATA結合蛋白3抗體Human WDR7 ELISA Kit腫瘤壞死因子β(TNF-β)免疫試劑盒

貝倫格葡萄座腔菌梨生?；土姿峄?/font>GATA結合蛋白4抗體Human WDR40A ELISA Kit孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒

Rhizobium nepotumGATM蛋白抗體Human WDR4 ELISA Kit誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)免疫試劑盒

冷生明串珠菌γ1氨基丁酸受體GABAA Rβ1抗體Human MFAP5(Microfibrillar-associated protein 5) ELISA Kit乙酰受體抗體(AChRab)免疫試劑盒

少根根霉G蛋白修補結構域蛋白2抗體Human WDR45 ELISA Kit循環(huán)免疫復合物(CIC)免疫試劑盒

北方蜜環(huán)菌過氧化酶1Human WDR46 ELISA Kit血小板因子4(PF-4/CXCL4)免疫試劑盒

海洋桿菌粒-巨噬克隆激因子抗體Human ZP3(Zona pellucida sperm-binding protein 3) ELISA Kit血管內皮生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒

副豬嗜血桿菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR62蛋白抗體Human WAPL/WAPAL ELISA Kit血管內皮生長因子(VEGF)免疫試劑盒

Bacillus subtilis subsp. inaquosorum癌雌激素調控蛋白GREB1抗體Human VWA2 ELISA Kit性激素結合球蛋白(SHBG)免疫試劑盒

柱枝雙孢霉生長分化因子9抗體Human WDR16 ELISA Kit脫氫表雄酮(DHEA)免疫試劑盒

細鏈格孢3-磷酸甘油脫氫酶抗體Human WDFY3 ELISA Kit天氨基轉移酶(AST)免疫試劑盒

肉桂鏈霉菌生長分化因子15/巨嗜抑制因子1抗體Human WARS2 ELISA Kit瘦素(LEP)免疫試劑盒
PCR檢測試劑盒: 海洋交替赤細菌 質量規(guī)格：100μg/ml,u=2%高香草酸

球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質量規(guī)格：分析標準品異內酯

茯苓Wolfiporia│cocos 質量規(guī)格：分析標準品延齡草苷

熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質量規(guī)格：10μg/ml,u=5%白樺脂

蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus Frankland and Frankland 質量規(guī)格：100μg/ml,u=4%白樺脂

冰島硫化葉菌Sulfolobus│islandicus 質量規(guī)格：10μg/ml,u=6%羽扇豆
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線（以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管，分別為6，5，4，3，2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭，從6號管中取5 μL溶液到5號管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭，從5號管中取5 μL溶液到4號管中，重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR（見下步），每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對數值為橫軸，繪制標準曲線。