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英文簡(jiǎn)稱：LU99A細(xì)胞    

產(chǎn)品名稱：大細(xì)胞肺癌

規(guī)格：T25

形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：1:10傳代

貨號(hào)：CS-X64073
公司產(chǎn)品僅用于科研公司有大量的優(yōu)質(zhì)細(xì)胞，還提供細(xì)胞的全程后期服務(wù)，可以向?qū)I(yè)人士咨詢?cè)敿?xì)的細(xì)胞培養(yǎng)條件，凍存方法，及相關(guān)培養(yǎng)技術(shù)。

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)范：

主要功能：
（1）血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化：
（1）主動(dòng)脈硬化。
（2）主動(dòng)脈瘤
（3）主動(dòng)脈鈣化。
基本特性：
（1）組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

IgE-Fc片段受體Ⅱ(FcεRⅡ)檢測(cè)試劑盒英文名稱：FcεRⅡ ELISA Kit組織蛋白酶A抗體包裝5g

G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)檢測(cè)試劑盒英文名稱：GPR120 ELISA KitCD34抗體包裝1g

G蛋白偶聯(lián)雌受體1(GPER)檢測(cè)試劑盒英文名稱：GPER ELISA Kit周期素D3抗體包裝100g

G蛋白β1(GNβ1)檢測(cè)試劑盒英文名稱：GNβ1 ELISA Kit緊密連接蛋白1抗體(C端)包裝25g

Gremlin1蛋白(GREM1)檢測(cè)試劑盒英文名稱：GREM1 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體包裝500g

GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)檢測(cè)試劑盒英文名稱：GATA2 ELISA Kit核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體包裝1g

F-框豐富重復(fù)蛋白3(FBXL3)檢測(cè)試劑盒英文名稱：FBXL3 ELISA Kit磷酸化鈣介質(zhì)素抗體包裝25g

FK506結(jié)合蛋白樣蛋白(FKBPL)檢測(cè)試劑盒英文名稱：FKBPL ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框26抗體包裝5g

E選擇素(SELE)檢測(cè)試劑盒英文名稱：SELE ELISA Kit衰變加速因子CD55抗體包裝5g

Endoglin蛋白(ENG)檢測(cè)試劑盒英文名稱：ENG ELISA KitCD59抗體包裝25g

EglNine同源物1(EGLN1)檢測(cè)試劑盒英文名稱：EGLN1 ELISA Kit畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(N端)包裝5g

EGF樣域蛋白7(EGFL7)檢測(cè)試劑盒英文名稱：EGFL7 ELISA Kit鈣激活蛋白酶14抗體包裝25g

EB病毒誘導(dǎo)蛋白3(EBI3)檢測(cè)試劑盒英文名稱：EBI3 ELISA Kit角蛋白18抗體（C端）包裝5g

E1A結(jié)合蛋白P300(EP300)檢測(cè)試劑盒英文名稱：EP300 ELISA Kit7型膠原抗體包裝5mg

E1A激活基因阻遏子1(CREG1)檢測(cè)試劑盒英文名稱：CREG1 ELISA Kit磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體包裝1g
LU99A細(xì)胞阿扎那韋（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Moxifloxacin Hydrochloride7號(hào)染色體開放閱讀框25抗體包裝1g

阿扎那韋硫酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Moxifloxacin HydrochlorideCOG1蛋白抗體包裝25g

艾地苯醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Salmeterol xinafoate過敏素C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體包裝5g

（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： NaproxenCD3抗體包裝1g

安倍生坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： NaproxenCP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體包裝5g

(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Prednisone電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體包裝1g

（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Prednisone煙堿型乙酰受體A2(神經(jīng)型)抗體包裝5g

（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Doxycycline monohydrate/Doxycycline baseC型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體包裝25g

(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Zoledronic acid hydrateγ干擾素誘導(dǎo)單核因子抗體包裝5g

/氨芐(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Zoledronic acid hydrate血小板因子4抗體包裝1g

鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Pamidronate Disodium血小板趨化因子7蛋白抗體包裝250mg

氨丁三（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pamidronate Disodium干擾素誘導(dǎo)T趨化因子抗體包裝5g

氨芬酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Gentamicin sulfate B-趨化因子抗體包裝100g

（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Gentamicin sulfate 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體包裝25g

（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cefuroxime Sodium 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體包裝5g
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡，co2孵箱。
1.2 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。