上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-05-22 14:24:53瀏覽次數(shù):341
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咨詢購買Fluo-3 AM(鈣離子熒光探針),請致電上海莼試生物技術(shù)有限公司,為您提供zui全面周到的產(chǎn)品服務(wù),除此之外,我公司*以下產(chǎn)品:
中文名稱:Fluo-3 AM(鈣離子熒光探針)
英文名字:Fluo-3 AM(鈣離子熒光探針)
產(chǎn)品描述
Fluo-3 AM是一種常用的檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針。
Fluo-3 AM是一種可以穿透細胞膜的熒光染料。Fluo-3 AM進入細胞后可以被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3,從而被滯留在細胞內(nèi)。Fluo-3游離配體幾乎是非熒光性的,其熒光不會隨鈣離子濃度升高而增強。Fluo-3可以和鈣離子結(jié)合,結(jié)合鈣離子后可以產(chǎn)生較強的熒光,zui大激發(fā)波長為506 nm,zui大發(fā)射波長為526 nm。實際檢測時使用的激發(fā)波長為488 nm左右,發(fā)射波長為525-530 nm??梢允褂眉す夤簿劢癸@微鏡或流式細胞儀檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。
本Fluo-3 AM(鈣離子熒光探針)是配制于無水DMSO(anhydrous DMSO)中的儲存液,濃度為5mM。
用于細胞內(nèi)鈣離子檢測時,F(xiàn)luo-3 AM的常用濃度為0.5-5 μM。通常用含有0.5-5μM的Fluo-3 AM的適當(dāng)溶液和細胞一起在20-37℃孵育15-60分鐘進行熒光探針裝載,隨后適當(dāng)洗滌,洗滌后可以考慮適當(dāng)再孵育20-30分鐘以確保Fluo-3 AM在細胞內(nèi)*轉(zhuǎn)變成Fluo-3。
保存條件
-20℃避光保存,6個月有效。
注意事項
本Fluo-3 AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
注意事項
1、 TTC 溶液若變成紅色則不可再用。
2、 顯色時要使種子全部浸入 TTC 染色液中。
3、 TCC 染色后應(yīng)立即觀察,不可久放。
4、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
Fluo-3 AM(鈣離子熒光探針)操作安全。
1、溶液P1在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA 全部加入),混勻,置于2-8℃保存。
2、*次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在漂洗液中加入無水乙醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇)。
3. 使用前請先檢查溶液P2、P3和P4是否出現(xiàn)混濁,如有混濁現(xiàn)象,可在37℃水浴中加熱幾分鐘,待溶液恢復(fù)澄清后再使用。
4. 洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于50ul,體積過小影響回收效率;洗脫液的pH值對洗脫效率也有影晌,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍), pH值低于7. 0會降低洗脫效率。 DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。
5. 質(zhì)粒DNA濃度>1mg/ml時清除內(nèi)毒素效率降低。由于質(zhì)粒DNA本身的性質(zhì),清除過程可導(dǎo)致部分質(zhì)粒DNA丟失,但內(nèi)毒素卻能得到zui大限度清除。
6. 所有溶液應(yīng)用無內(nèi)毒素的高純水配制,所有器械材料均應(yīng)不含內(nèi)毒素,玻璃器皿可高溫烘烤,非揮發(fā)性水溶液可高壓處理。
7. DNA濃度及純度檢測:得到的質(zhì)粒DNA純度與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)。 得到的DNA可用瓊脂糖疑膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。 DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰,OD260值為1相當(dāng)于大約50μg/ml雙鏈DNA、 40μg/ml單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響吸光值,但并不表示純度低。
胞裂解液 (陽性對照) (變性)
FUT10 Others Human 人 FUT10 / Fucosyltransferase 10 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
NT5E Others Mouse 小鼠 NT5E / CD73 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
TNFRSF21 Others Human 人 DR6 / TNFRSF21 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD8A Others Human 人 CD8A / MAL 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
REG3A Others Human 人 REG3A / HIP 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
REG1A Others Human 人 REG1A / PSPS 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD5 Others Mouse 小鼠 CD5 / LEU1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SERPINA3C Others Mouse 小鼠 SERPINA3C / Serpina3c 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SERPINF1 Others Human 人 SerpinF1 / SERPINF1 / PEDF 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CA4 Others Mouse 小鼠 Car4 / CA4 / CAIV 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
EPHA6 Others Mouse 小鼠 EphA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
BTC Others Mouse 小鼠 BTC / Betacellulin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SMYD3 Others Human 人 SMYD3 / ZMYND1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
DLL4 Others Human 人 DLL4 / Delta4 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
MEP1A Others Mouse 小鼠 MEP1A 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
HAVCR1 Others Rat 大鼠 KIM1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
Fluo-3 AM(鈣離子熒光探針)BSG Others Mouse 小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
BSG Others Mouse 小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD8A Others Mouse 小鼠 CD8a / Lyt2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)