上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-05-22 14:25:40瀏覽次數(shù):416
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中文名稱:Fluo-4 AM(鈣離子熒光探針)
英文名字:Fluo-4 AM(鈣離子熒光探針)
產(chǎn)品描述
Fluo-4 AM是zui常用的檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針之一。Fluo-4 AM將Fluo-3 AM結(jié)構(gòu)中的氯原子替換成了氟原子,導(dǎo)致它的zui大激發(fā)波長(zhǎng)會(huì)向短波長(zhǎng)處偏離10 nm左右。這個(gè)波長(zhǎng)更接近于氬激光器的波長(zhǎng)488 nm,所以用氬激光器激發(fā)時(shí),F(xiàn)luo-4的熒光強(qiáng)度會(huì)比Fluo-3強(qiáng)一倍。由于Fluo-4與鈣離子的親和力和Fluo-3相近,所以使用上和Fluo-3基本相同,可以使用激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。
Fluo-4 AM是Fluo-4的乙酰甲酯衍生物,能夠穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞中。Fluo-4 AM進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-4,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fluo-4可以和鈣離子結(jié)合,結(jié)合鈣離子后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光,zui大激發(fā)波長(zhǎng)為494 nm,zui大發(fā)射波長(zhǎng)為516 nm。
本Fluo-4 AM(鈣離子熒光探針) 是配制于無水DMSO (anhydrous DMSO)中的儲(chǔ)存母液,濃度為2mM。
用于細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測(cè)時(shí),F(xiàn)luo-4 AM的常用濃度為0.5-5 μM。通常用含有0.5-5μM的Fluo-4 AM的適當(dāng)溶液和細(xì)胞一起在20-37℃孵育10-60分鐘進(jìn)行熒光探針裝載,隨后適當(dāng)洗滌,洗滌后可以考慮適當(dāng)再孵育20-30分鐘以確保Fluo-4 AM在細(xì)胞內(nèi)充分轉(zhuǎn)變成Fluo-4。
保存條件
-20℃避光保存,6個(gè)月有效。
Fluo-4 AM(鈣離子熒光探針)注意事項(xiàng)
1. Fluo-4 AM遇水極易分解,建議*次使用時(shí),母液分裝并密封保存,同時(shí)注意保持干燥。
2. Fluo-4 AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. 探針的工作濃度、細(xì)胞量、孵育溫度和時(shí)間等需要根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)預(yù)先摸索。
4. 熒光染料均存在淬滅問題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
5. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
6. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
Fluo-4 AM(鈣離子熒光探針)操作說明:
1.將待測(cè)種子用溫水(30-35℃)浸泡2~6h,使種子充分吸脹。
2.隨機(jī)取種子100粒,沿種胚中心線縱切為兩半,將每粒種子的一半分別置于兩個(gè)培養(yǎng)皿中,備用。
3.(可選)可將其中一半種子置于沸水中煮沸5min,殺死細(xì)胞,作為陰性對(duì)照。
4.向含有種子的培養(yǎng)皿中加入TTC溶液,以浸沒種子為度。
5.放入30-35℃的恒溫箱內(nèi)保溫30min-1h。
6.倒出TTC染色液,用自來水沖洗2~3次,立即觀察種子著染況。
Fluo-4 AM(鈣離子熒光探針)主要優(yōu)級(jí)純、分級(jí)純和化學(xué)純3種:
(1)優(yōu)級(jí)純(GR:Guaranteed reagent),又稱一級(jí)品或保證試劑,99.8%,這種試劑純度zui高,雜質(zhì)含量zui低,適合于重要精密的分析工作和科學(xué)研究工作,使用綠色瓶簽。
(2)分析純(AR),又稱二級(jí)試劑,純度很高,99.7%,略次于優(yōu)級(jí)純,適合于重要分析及一般研究工作,使用紅色瓶簽。
(3)化學(xué)純(CP),又稱三級(jí)試劑,≥ 99.5%,純度與分析純相差較大,適用于工礦、學(xué)校一般分析工作。使用藍(lán)色(深藍(lán)色)標(biāo)簽。
(4)實(shí)驗(yàn)試劑(LR:Laboratory reagent),又稱四級(jí)試劑。
公司提供的*,貨源充足。嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系,包括:優(yōu)級(jí)純,分析純,化學(xué)純,試劑級(jí),基準(zhǔn)試劑,實(shí)驗(yàn)純,教學(xué)試劑,高純?cè)噭V純,光譜純,電子純。各種包裝規(guī)格,并可提供包裝定制,咨詢訂購。
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