上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-05-22 17:02:29瀏覽次數(shù):288
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中文名稱:Sybr green I (PCR級,10000X)
英文名字:Sybr green I (PCR級,10000X)
規(guī)格:50/100ul
保存:-20℃避光保存,有效期至少一年。
產(chǎn)品說明:
SYBR Green I 染料是一種直接與雙鏈 DNA (dsDNA) 結(jié)合的熒光染料,是熒光定量PCR zui常用的DNA結(jié)合染料。在定量 PCR中,SYBR Green I可與雙鏈DNA(dsDNA)非特異性結(jié)合后發(fā)出熒光,則可以通過檢測反應(yīng)體系中的SYBR Green I 熒光強(qiáng)度,達(dá)到檢測PCR 產(chǎn)物擴(kuò)增量的目的。游離狀態(tài)下,SYBR Green I發(fā)出微弱的熒光,一旦與dsDNA結(jié)合,其熒光增加1000倍,一個反應(yīng)發(fā)出的全部熒光信號與出現(xiàn)的dsDNA量成比例,且會隨擴(kuò)增產(chǎn)物的增加而增加;所以通過檢測PCR 反應(yīng)液中的熒光信號強(qiáng)度,可以對目的基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量,同時還可以測定擴(kuò)增的目的DN段的熔解溫度。
使用說明:
使用時,配置PCR反應(yīng)混合液,將10000×SYBR Green I濃縮液加入到PCR反應(yīng)體系,使終濃度為0.5× (0.2×到1×之間調(diào)整)。以上操作建議在冰上進(jìn)行。
注:① 反應(yīng)液配制方法和PCR 擴(kuò)增條件請參照DNA聚合酶使用說明。
② Realtime PCR 擴(kuò)增儀的使用方法,請參照各儀器說明書。
注意事項:
Sybr green I (PCR級,10000X)使用濃度對熒光PCR結(jié)果的影響
SYBR Green I的使用濃度是保證熒光定量PCR實驗成功非常關(guān)鍵的因素。如果SYBR Green I的濃度過低會使熒光信號的變化降低,這就意味著低拷貝的樣品可能無法檢出;而在高濃度時,將會抑制PCR反應(yīng),降低PCR反應(yīng)效率。所以一般在使用SYBR Green I時應(yīng)根據(jù)實際情況優(yōu)化使用濃度,反應(yīng)的終濃度為0.2×到1×之間。
鎂離子濃度的影響
提高鎂離子濃度可以降低SYBR Green I對PCR反應(yīng)的抑制作用。我們建議在用SYBR Green I進(jìn)行熒光PCR反應(yīng)時,鎂離子濃度比無SYBR Green I 的普通 PCR 反應(yīng)高出0.5~3mM。
Sybr green I (PCR級,10000X)操作說明:
1.將待測種子用溫水(30-35℃)浸泡2~6h,使種子充分吸脹。
2.隨機(jī)取種子100粒,沿種胚中心線縱切為兩半,將每粒種子的一半分別置于兩個培養(yǎng)皿中,備用。
3.(可選)可將其中一半種子置于沸水中煮沸5min,殺死細(xì)胞,作為陰性對照。
4.向含有種子的培養(yǎng)皿中加入TTC溶液,以浸沒種子為度。
5.放入30-35℃的恒溫箱內(nèi)保溫30min-1h。
6.倒出TTC染色液,用自來水沖洗2~3次,立即觀察種子著染況。
Sybr green I (PCR級,10000X)主要優(yōu)級純、分級純和化學(xué)純3種:
(1)優(yōu)級純(GR:Guaranteed reagent),又稱一級品或保證試劑,99.8%,這種試劑純度zui高,雜質(zhì)含量zui低,適合于重要精密的分析工作和科學(xué)研究工作,使用綠色瓶簽。
(2)分析純(AR),又稱二級試劑,純度很高,99.7%,略次于優(yōu)級純,適合于重要分析及一般研究工作,使用紅色瓶簽。
(3)化學(xué)純(CP),又稱三級試劑,≥ 99.5%,純度與分析純相差較大,適用于工礦、學(xué)校一般分析工作。使用藍(lán)色(深藍(lán)色)標(biāo)簽。
(4)實驗試劑(LR:Laboratory reagent),又稱四級試劑。
公司提供的*,貨源充足。嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系,包括:優(yōu)級純,分析純,化學(xué)純,試劑級,基準(zhǔn)試劑,實驗純,教學(xué)試劑,高純試劑,色譜純,光譜純,電子純。各種包裝規(guī)格,并可提供包裝定制,咨詢訂購。
magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N3 重組甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N3 重組甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Japanese white-eye/Hong Kong/1038/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H10N3 重組甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H2N2 重組甲型流感 H2N2 (A/Canada/720/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素HA1 Sybr green I (PCR級,10000X)(Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H1N3 重組甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)