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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間：2017-06-01 08:15:44瀏覽次數(shù)：321
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公司是*的ATCC細胞供應商，提供人胚腎二倍體細胞；CCC-HEK-1的報價，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購。
細胞名稱 人胚腎二倍體細胞；CCC-HEK-1
形態(tài)特性 圓形；多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 取材自引產(chǎn)的15周胚胎，中國醫(yī)學基礎(chǔ)醫(yī)學研究所細胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 P11
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì)：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。
4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
IGF1R MAb Human IGF1R / CD221 兔單抗 (PE) FCM
CD27 MAb Human CD27 / TNFRSF7 兔單抗 (PE) FCM
ALDH7A1 MAb Human ALDH7A1 兔單抗 (PE) FCM
ALDH7A1 MAb Human ALDH7A1 兔單抗 (FITC) FCM
DIABLO MAb Human SMAC / Diablo 兔單抗 (FITC) FCM
RHOA MAb Human RhoA 兔單抗 (FITC) FCM
S100A7 MAb Human S100A7 兔單抗 (FITC) FCM
HSPB1 MAb Human HSP27 兔單抗 (FITC) FCM
FLT1 MAb Human VEGFR1 / FLT-1 兔單抗 FCM
SCARB2 MAb Mouse LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (PE) FCM
SCARB2 MAb Mouse LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (FITC) FCM
SOD1 MAb Human SOD1 / Superoxide Dismutase 兔單抗 (FITC) FCM
OSMR MAb Human OSMR / IL-31RB 兔單抗 (PE) FCM
EPHB3 MAb Mouse EphB3 / HEK2 兔單抗 (PE) FCM
EPHB2 MAb Human EPHB2 / Hek5 兔單抗 (PE) FCM
CNTF MAb Rat CNTF 兔單抗 ELISA
DKK1 MAb Human DKK-1 兔單抗 WB
C1D MAb Human C1D 兔單抗 WB
PRDX5 MAb Human Peroxiredoxin 5 / PRDX5 兔單抗 WB
L1CAM MAb Human CD171 / N-CAML1 / L1CAM 兔單抗 (PE) FCM
AGT MAb Human Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 兔單抗 (FITC) FCM
LXN MAb Human Latexin / Lxn 兔單抗 (PE) FCM
LAMP1 MAb Human LAMP-1 / CD107a 兔單抗 (FITC) FCM
LAMP1 MAb Human LAMP-1 / CD107a 兔單抗 (PE) FCM
ENG MAb Human Endoglin / CD105 / ENG 兔單抗 (PE) FCM
RBP4 MAb Mouse RBP4 兔單抗 (FITC) FCM
ICOSLG MAb Human ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 兔單抗 (FITC) FCM
CD274 MAb Mouse PD-L1 / B7-H1 / CD274 兔單抗 (PE) FCM
CDH2 MAb Human N-Cadherin / CD325 / CDH2 兔單抗 (FITC) FCM
IL16 MAb Human IL-16 兔單抗 IHC-P
C5 MAb Human Complement C5a 兔單抗 IHC-P
CLEC3B MAb Human CLEC3B / Tetranectin 兔單抗 IHC-P
HSPB1 MAb Human HSP27 / HSPB1 兔單抗 ICC/IF IF
GBA3 MAb Human GBA3 兔單抗 ICC/IF IF
ERBB2 MAb Human HER2 / ErbB2 / CD340 兔單抗 (APC) FCM
CD36 MAb Human CD36 / SCARB3 兔單抗 (PE) FCM
ADAM15 MAb Human ADAM15 兔單抗 (PE) FCM
TACSTD2 MAb Human TROP2 / TACSTD2 兔單抗 (PE) FCM
CD226 MAb Mouse CD226 / DNAM-1 兔單抗 (PE) FCM
EPCAM MAb Mouse EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 兔單抗 (PE) FCM
