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上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格，ELISA試劑盒報(bào)價(jià) |
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更新時(shí)間：2017-06-01 09:05:06瀏覽次數(shù)：336
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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供恒河猴胚腎細(xì)胞；FRhK-4 [FRhK4]的報(bào)價(jià)，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱 恒河猴胚腎細(xì)胞；FRhK-4 [FRhK4]
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 FRhK-4細(xì)胞株來自300克重恒河猴正常雌性胚胎的腎組織。該細(xì)胞系是上皮細(xì)胞樣的連續(xù)細(xì)胞株，且已被數(shù)家實(shí)驗(yàn)室用作甲型肝炎研究。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C57
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
恒河猴胚腎細(xì)胞；FRhK-4 [FRhK4]培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。
4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
UNC5B cDNA Rat 大鼠 UNC5B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TIMP1 cDNA Rat 大鼠 TIMP1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TEK cDNA Rat 大鼠 TEK / Tie2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PRLR cDNA Rat 大鼠 PRLR 基因全長(zhǎng)ORF克隆
APCS cDNA Rat 大鼠 APCS / SAP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CXCL5 cDNA Rat 大鼠 CXCL5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
LCN2 cDNA Rat 大鼠 LCN2 / NGAL 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CXCL10 cDNA Rat 大鼠 CXCL10 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PECAM1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD31 / PECAM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCGRT cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FCGRT 基因全長(zhǎng)ORF克隆
YWHAB cDNA Cynomolgus 食蟹猴 YWHAB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CXCL13 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CXCL13 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNF cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TNF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCGR1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD64 / FCGR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCGR2A cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FCGR2A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCGR2B cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FCGR2B / CD32B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCGR3 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FCGR3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL18 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 IL18 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL1B cDNA Cynomolgus 食蟹猴 IL1B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CXCL12 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CXCL12 / SDF1b 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IFNG cDNA Cynomolgus 食蟹猴 IFNG 基因全長(zhǎng)ORF克隆
THBS1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 THBS1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PVR cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD155 / PVR 基因全長(zhǎng)ORF克隆
THPO cDNA Cynomolgus 食蟹猴 Thrombopoietin / THPO 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SFTPD cDNA Cynomolgus 食蟹猴 SFTPD 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CRP cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CRP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TP53 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TP53 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FABI cDNA E. coli 大腸桿菌 FABI 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NRP1 cDNA Rat 大鼠 Neuropilin-1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EPO cDNA Rat 大鼠 EPO 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PDGFB cDNA Rat 大鼠 PDGFB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NXPH3 cDNA Rat 大鼠 NXPH3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
恒河猴胚腎細(xì)胞；FRhK-4 [FRhK4]INHBA cDNA Rat 大鼠 INHBA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GDNF cDNA Rat 大鼠 GDNF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MMP9 cDNA Rat 大鼠 MMP-9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
