上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-06-01 09:05:36瀏覽次數(shù):325
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細(xì)胞名稱(chēng) 羅猴胎腎細(xì)胞;MA104
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 MA 104 細(xì)胞衍生于羅猴胎腎。細(xì)胞對(duì)猴輪狀病毒 (Simian rotavirus SA11) 高度敏感??捎糜诤芏嗖《镜脑鲋场?
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C11
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
羅猴胎腎細(xì)胞;MA104實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱(chēng)稱(chēng)量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開(kāi)皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開(kāi)兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下,以助染色體更好分散和展開(kāi)。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類(lèi)染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷(xiāo)售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶(hù)收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶(hù)需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶(hù)提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
EFNA1 cDNA Rat 大鼠 EFNA1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
VEGFB cDNA Rat 大鼠 VEGFB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
KDR cDNA Rat 大鼠 KDR 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EFNB3 cDNA Rat 大鼠 EFNB3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ERBB3 cDNA Rat 大鼠 ERBB3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EFNA2 cDNA Rat 大鼠 EFNA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
B3GAT1 cDNA Rat 大鼠 B3GAT1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EFNB2 cDNA Rat 大鼠 EFNB2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EFNB1 cDNA Rat 大鼠 EFNB1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EFNA5 cDNA Rat 大鼠 EFNA5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FIGF cDNA Rat 大鼠 FIGF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
VEGFC cDNA Rat 大鼠 VEGFC 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FLT1 cDNA Rat 大鼠 FLT1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EGFR cDNA Rat 大鼠 EGFR 基因全長(zhǎng)ORF克隆
INSR cDNA Rat 大鼠 INSR 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TFRC cDNA Rat 大鼠 TFRC 基因全長(zhǎng)ORF克隆
Shiga toxin II subunit B cDNA E. coli 大腸桿菌 (Shiga toxin) STX2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PGC cDNA Rat 大鼠 PGC 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MS4A2 cDNA Rat 大鼠 MS4A2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCAMR cDNA Rat 大鼠 FCAMR 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCGRT cDNA Rat 大鼠 FCGRT 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCER1G cDNA Rat 大鼠 FCER1G 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PECAM1 cDNA Rat 大鼠 CD31 基因全長(zhǎng)ORF克隆
YWHAE cDNA Rat 大鼠 YWHAE 基因全長(zhǎng)ORF克隆
UCHL1 cDNA Rat 大鼠 UCHL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CA13 cDNA Rat 大鼠 CA13 基因全長(zhǎng)ORF克隆
UCHL3 cDNA Rat 大鼠 UCHL3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD4 cDNA Rat 大鼠 CD4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCL27 cDNA Rat 大鼠 CCL27 基因全長(zhǎng)ORF克隆
WFDC2 cDNA Rat 大鼠 WFDC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL7R cDNA Rat 大鼠 IL7RA / CD127 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL10 cDNA Rat 大鼠 IL10 基因全長(zhǎng)ORF克隆
THPO cDNA Rat 大鼠 Thrombopoietin / THPO 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL23A cDNA Rat 大鼠 IL23A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ERBB2 cDNA Rat 大鼠 ERBB2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL12A cDNA Rat 大鼠 IL12A / P35 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL9R cDNA Rat 大鼠 IL9R 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL6 cDNA Rat 大鼠 IL6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL2 cDNA Rat 大鼠 IL2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL2RA cDNA Rat 大鼠 CD25 / IL2Ra 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL1RN cDNA Rat 大鼠 IL1RN / IL1F3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL18 cDNA Rat 大鼠 IL18 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IgG2c cDNA Rat 大鼠 IgG2C 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PDGFA cDNA Rat 大鼠 PDGFA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
AMHR2 cDNA Rat 大鼠 AMHR2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PPBP cDNA Rat 大鼠 CXCL7 / Ppbp 基因全長(zhǎng)ORF克隆