上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-01 09:10:34瀏覽次數(shù):282
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公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商,提供 非洲綠猴腎細胞;VERO E6的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細胞名稱 非洲綠猴腎細胞;VERO E6
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞為VERO 76的克隆,對胡寧病毒,馬丘波、拉沙等病毒敏感。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:4,每周換液2-3次
傳代情況 P25
凍存條件 90%FBS+10%DMSO
支原體檢測
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
FGFR1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FGFR1 基因全長ORF克隆
FGF12 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FGF12 基因全長ORF克隆
FGF13 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FGF13 基因全長ORF克隆
FGF16 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FGF16 基因全長ORF克隆
FGF7 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FGF7 基因全長ORF克隆
BMP10 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 BMP10 基因全長ORF克隆
GDF15 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 GDF15 基因全長ORF克隆
GDF6 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 GDF6 基因全長ORF克隆
ACVR1C cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ACVR1C 基因全長ORF克隆
ACVR1B cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ACVR1B 基因全長ORF克隆
BMPR2 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 BMPR2 基因全長ORF克隆
BMPR1A cDNA Cynomolgus 食蟹猴 BMPR1A 基因全長ORF克隆
TGFBR2 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 基因全長ORF克隆
FGF1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FGF1 基因全長ORF克隆
HFE2 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 HFE2 基因全長ORF克隆
ACVRL1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ACVRL1 基因全長ORF克隆
ACVR2A cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2A 基因全長ORF克隆
ACVR1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ACVR1 基因全長ORF克隆
BMP3 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 BMP3 基因全長ORF克隆
GDF3 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 GDF3 基因全長ORF克隆
GDF2 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 GDF2 基因全長ORF克隆
BMP5 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 BMP5 基因全長ORF克隆
MS4A1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 MS4A1 基因全長ORF克隆
CD19 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD19 基因全長ORF克隆
CD38 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD38 基因全長ORF克隆
CD27 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD27 基因全長ORF克隆
CD3G cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD3G 基因全長ORF克隆
IL20 cDNA Rat 大鼠 IL20 基因全長ORF克隆
CD109 cDNA Rat 大鼠 CD109 基因全長ORF克隆
CNTN2 cDNA Rat 大鼠 CNTN2 基因全長ORF克隆
JAG1 cDNA Rat 大鼠 JAG1 基因全長ORF克隆
TLR1 cDNA Rat 大鼠 TLR1 基因全長ORF克隆
BST2 cDNA Rat 大鼠 BST2 基因全長ORF克隆
IGSF8 cDNA Rat 大鼠 IGSF8 基因全長ORF克隆
LAIR1 cDNA Rat 大鼠 LAIR1 基因全長ORF克隆
CD302 cDNA Rat 大鼠 CD302 基因全長ORF克隆
CD300LG cDNA Rat 大鼠 CD300LG 基因全長ORF克隆
CD300E cDNA Rat 大鼠 CD300E 基因全長ORF克隆
CD300A cDNA Rat 大鼠 CD300A 基因全長ORF克隆
CNTN5 cDNA Rat 大鼠 CNTN5 基因全長ORF克隆
SLC44A1 cDNA Rat 大鼠 SLC44A1 基因全長ORF克隆
F3 cDNA Rat 大鼠 F3 基因全長ORF克隆
ACE cDNA Rat 大鼠 ACE 基因全長ORF克隆
NTRK1 cDNA Rat 大鼠 NTRK1 基因全長ORF克隆
MFI2 cDNA Rat 大鼠 MFI2 基因全長ORF克隆