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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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/人胚肺成纖維細(xì)胞;2BS
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更新時(shí)間:2017-06-06 09:58:59瀏覽次數(shù):492

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【簡(jiǎn)單介紹】
人 /人胚肺成纖維細(xì)胞;2BS
收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)銷(xiāo)售人員,我們將盡快為您解決。

細(xì)胞名稱(chēng)  /人胚肺成纖維細(xì)胞;2BS  
形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣   
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)  
特征特性   該細(xì)胞由中國(guó)藥品生物制品檢定所細(xì)胞室王佑春主任贈(zèng)送并保藏。細(xì)胞能作為多種人類(lèi)病毒的宿主,用于病毒學(xué)基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。   
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS   
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代  
傳代情況  C10  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS   
支原體檢測(cè)  陰性   
STR   STR鑒定  
同工酶    
染色體    
使用權(quán)限  A類(lèi)  /人胚肺成纖維細(xì)胞;2BS
實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱(chēng)稱(chēng)量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開(kāi)皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開(kāi)兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下,以助染色體更好分散和展開(kāi)。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類(lèi)染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷(xiāo)售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。  
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞  
細(xì)胞介紹  
該細(xì)胞能合成復(fù)合胺,腎上腺素。  
細(xì)胞特性  
1)來(lái)源:人結(jié)腸癌  
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣  
3)含量:>1x106個(gè)/mL  
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性  
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運(yùn)輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺(tái)棄去上清,加入使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。  
人結(jié)腸癌細(xì)胞  
細(xì)胞介紹  
該細(xì)胞系1957年由T.U.Sample等從患有結(jié)腸癌的70歲男性白人的腹水分離。 該病人在取腹水樣品前已用5-氟治療4-6周。角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。  
細(xì)胞特性  
1)  來(lái)源:結(jié)直腸腺癌,腹水轉(zhuǎn)移  
2)  形態(tài):上皮細(xì)胞樣  
3)  含量:>1x106 個(gè)/mL  
4)  污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性  
5)  規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運(yùn)輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺(tái)棄去上清,加入使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。  
人回盲腸癌細(xì)胞  
細(xì)胞介紹  
HCT-8與HRT-18是一樣的。角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。  
細(xì)胞特性  
1)來(lái)源:結(jié)腸  
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣  
3)含量:>1x106 個(gè)/mL  
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性  
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運(yùn)輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺(tái)棄去上清,加入使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。  
人結(jié)直腸癌氟耐藥株  
細(xì)胞介紹  
這是一株耐藥細(xì)胞株。  
細(xì)胞特性  
1)來(lái)源:人結(jié)腸癌  
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣  
3)含量:>1x106 個(gè)/mL  
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性  
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運(yùn)輸和保存:可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。  
人結(jié)腸癌耐藥株  
細(xì)胞介紹  
這是一株耐藥細(xì)胞株。  
細(xì)胞特性  
1)來(lái)源:人結(jié)腸癌  
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣  
3)含量:>1x106 個(gè)/mL  
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性  
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運(yùn)輸和保存:可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。  
未分化腸上皮細(xì)胞  
細(xì)胞特性  
1) 來(lái)源:腸道  
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣  
3) 含量:>1x106 個(gè)/mL  
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性  
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運(yùn)輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺(tái)棄去上清,加入使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存  
神經(jīng)內(nèi)分泌分化的結(jié)腸癌細(xì)胞上皮細(xì)胞  
細(xì)胞特性  
1)來(lái)源:結(jié)腸癌  
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣 



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